02.实验流程 1、将处理过的细胞胰酶消化后计数,接种1000个细胞至96孔板,每孔100μl培养基,将培养板置37℃,5% CO₂培养箱中培养0 h、24h、48h和72h;2、每孔加入10μl CCK-8溶液,用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照;3、在细胞培养箱内继续孵育0.5h,用酶标仪在450nm测定...
实验流程和操作步骤 01实验分组（每组建议3-6个复孔）实验组：药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂（见下表黄色列）对照组：不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂（见下表绿色列）空白组：不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂（见下表蓝色列）PBS孔：灰色，防止液体过度蒸发排版参考：02实验方案 1.种板细胞数：细...
7. 若样本有氧化性或还原性,可在加入CCK-8之前更换新鲜培养基,去掉待测药物的影响。当样本影响比较小的情况下可以不更换培养基。 8. 拍照时若有沉淀、结晶或较脏,要用PBS洗一遍,加培养基后再加CCK8。 9. 加CCK-8时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,干扰OD值。加CCK-8试剂...
CCK-8,英文全称是Cell Counting Kit-8。CCK-8试剂盒可用于简便而准确的细胞增殖和细胞毒性分析。 实验原理 CCK-8试剂盒中,最主要化学药品是WST-8【化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四...
01 CCK8 Cell Counting Kit-8,简称 CCK-8 试剂盒,CCK-8 是检测细胞活性的。 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析:用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物 等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。 CCK-8 溶液可以直接加入到细胞样品中,不需要预配各种成分。
(完整版)CCK8细胞增殖实验CCK8细胞增殖实验 1.首先保证细胞消化下来后吹打成单细胞悬液,然后计数准确,接受每个孔前都将细胞悬液充分混匀。接种完成后,整个96孔板按十字形来回充分晃动,保证细胞接种后在每个孔中都平均分布,否则测定OD值时重复孔会出现大幅度波动,影响结果。 2.消化细胞前先用PBS或者生理盐水清洗细胞...
Cell Counting Kit-8，简称CCK-8，主要成份是四唑盐WST-8，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的formazan，其颜色深浅程度与细胞数量呈正比。因此，CCK-8试剂常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等实验。CCK-8的优点 1. 产生的甲瓒产物是水溶性的，根本无需换液，...
1)制备细胞悬液,计数。 2)在96孔板中接种细胞悬液,每孔约100μl,同样的样本可做3个重复。 3)将培养板放入培养箱中预培养一段时间(37℃, 5%CO2),细胞贴壁需要大约2-4h,如果是悬浮细胞,该步骤可以省去。 4)每孔各加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议在...
MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物)和CCK8(细胞计数检测试剂盒)是常用的细胞增殖检测方法。它们都可以间接评估细胞数量,但具有一些区别。 MTT法 1. 检测原理 MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性...
4.加入CCK-8:两种方法,每孔直接加入10ul的CCK-8溶液,或者配置成含10%CCK-8溶液的培养基以换液的形式加入,注意加入过程中避免产生气泡,可以将枪头浸入培养液中缓慢加入。 5.加入CCK-8后孵育时间:将加完CCK-8的培养板放入37°C 5%CO2 培养箱中孵育1-4h,CCK-8试剂加入后孵育时间也需要自己摸索,随着时间的增...