01实验分组（每组建议3-6个复孔）实验组：药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂（见下表黄色列）对照组：不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂（见下表绿色列）空白组：不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂（见下表蓝色列）PBS孔：灰色，防止液体过度蒸发排版参考：02实验方案 1.种板细胞数：细胞增殖实验：每孔加...
1.种板细胞数: 细胞增殖实验:每孔加入约1000-2000个细胞,100μl培养基,每0,24,48,72h检测细胞的OD值。 细胞毒性实验:每孔加入约5000～10000个细胞,100μl培养基(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。孔板周围加100μL PBS防止过度蒸发。 2.检测方法 在对应的检测时间点,...
准备5个96孔板(检测5天)。吹匀细胞悬液,向96孔细胞培养板每孔中加入100微升细胞悬液,每个实验组设至少3个重复孔。 4.添加CCK-8试剂 根据细胞培养板的孔数,取相应量的CCK-8试剂并稀释到合适的浓度,通常使用CCK-8试剂与培养基的体积比为1:10(参考CCK8试剂盒说明书),然后取10微升CCK-8试剂加入到第0天的96...
实验一:细胞增殖分析 实验二:细胞毒性分析 活力计算: 注意事项: ☆ 计算公式: CCK-8 常见问题解答 前言 科研中的我们,细胞毒性试验是必备的,实验中常遇见各种细节问题,例如细胞数量的不统一或者0加药组与对照组未加适量的有机溶剂(常为DMSO,给药组溶剂),因此会导致出现不同的结果,当然很多同学在做cck8时候会用...
使用酶标仪在450nm波长处测OD值,可间接性反应活细胞的数量。是一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。 因此,CCK-8实验可用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。 操作步骤 ...
CCK-8,英文全称是Cell Counting Kit-8。CCK-8试剂盒可用于简便而准确的细胞增殖和细胞毒性分析。 实验原理 CCK-8试剂盒中,最主要化学药品是WST-8【化学名为2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四...
酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰,可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 CCK8可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染,以免影响结果。 CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。
步骤:首先制作标准曲线(测定细胞具体数量);其次进行细胞活性检测;最后进行细胞增殖-毒性检测。注意事项:先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。 一. 制作标准曲线(测定细胞具体数量) 1、首先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。
增殖检测一般用于分析分裂中的细胞数量的变化,进而反应细胞的生长状态及活性,细胞增殖检测是细胞分析和药物研发中经常会使用的手段。目前广泛应用于肿瘤生物学,分子生物学,药代动力学等领域。 CCK-8 基本原理 基本原理为:该试剂中含有 WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二...
一、实验原理 CCK8法是一种基于WST-8的用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度、无放射性的比色检测法。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被活细胞线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于...