如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 CCK-8溶液对细胞的毒性大小如何? CCK-8溶液对细胞的毒性非常低,通常观察不到细胞毒性。细胞在CCK-8法检测后仍然可以正常生长,并可以用于其它的细胞实验。但为了避免CCK-8溶液可能带来的对于后续检测的影响,除...
CCK-8是一种高灵敏度、无放射性的比色检测法,用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数量,可替代传统的MTT法,常应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。尽管有人戏称CCK-8测细胞增殖实验只要有试剂盒就“有手就行”,但实际操作中仍有许多细节需要注意。本期细胞学堂将详细介绍CCK-8法的原理...
2.37°培养箱培育,一般贴壁细胞培养2-4小时,如果悬浮细胞的话可以省去孵育时间 3.每孔加入培养基1/10量的CCK-8,例如,培养基是100微升,那么CCK-8的量为10微升(如果是24孔板或其他规格的孔板,加入1/10培养基的量即可) 4.4块板同时放入孵育箱孵育,1小时后拿第一块板检测OD值,2小时后拿第二块板检测OD值......
⑨ 建议采用多通道移液器,以减小平行孔间的差异。 三、MTT和CCK-8对比 MTT和CCK8区别主要体现在以下几个方面: 1. 原理不同: Mtt实验基于细胞内还原酶活性的检测,而CCK8实验基于细胞内活性代谢产生的水溶性四唑酮盐的还原反应。 2. 应用场景不同 Mtt实验适用于各种类型的细胞,包括悬浮细胞和贴壁细胞,适用于细...
添加处理物：向孔中加入待测的化合物或药物溶液。CCK8孵育：在一定时间后，向孔中加入CCK8溶液，继续孵育一段时间。吸光度测量：使用酶标仪测定各孔中的吸光度(OD值)，通常在450 nm波长处。数据分析：通过比较处理组和对照组的OD值，计算细胞活力百分比，评估细胞毒性。MTT与CCK8实验的比较 MTT实验通常需要较长时间...
细胞增殖和细胞毒性(..·CCK-8法的重复性优于MTT法,产生的formazan是水溶性的,减少因洗涤和溶解带来的误差;·CCK-8法对细胞毒性小,可以多次测定选取最佳测定时间,与MTT方法相比线性范围更宽,灵敏度更高;
4.设置空白对照,在无细胞的培养基中加入CCK-8检测,去除本底对吸光值的干扰。 5.如果OD值太高,建议降低细胞接种密度或减少CCK-8试剂孵育时间。 cck8细胞增值检测试剂盒的优点包括操作简单、灵敏度高、反应时间短,适用于高通量筛选。它广泛应用于药物筛选、细胞增殖研究、细胞毒性测试和肿瘤药敏试验等领域。
6、测定OD值：取出96孔板，用酶标仪在450 nm波长下检测各孔的OD值，分析处理数据，绘制增殖曲线。7. ...
(4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% 对照:具有细胞、培养基、CCK-8的孔的OD值 实验:具有细胞、培养基、CCK-8和药物溶液的孔的OD值 ...
吸光度（OD值）的测定，与细胞活力成正比，使得CCK-8的检测效能远超同类试剂如MTT、XTT、MTS或WST-1。实验验证一：细胞毒性与治疗潜力 在验证iZAK2对衰老相关自身免疫的治疗效果时，研究者使用CCK-8对小鼠原代CD4+ T细胞进行评估。实验结果显示，iZAK2处理并未影响细胞活力或细胞质DNA积累，反而在老龄...