研究者将T-DNA插入到拟南芥的D基因中,致使该基因失活,失活后的基因记为d。根据D基因、T-DNA的部分序列,设计了三种引物,如下图所示。欲鉴定某植株的基因型,应选择的
[详解]根据题干“已知完整的基因E和T-DNA整合后,因片段长度过大,不能完成整个融合基因的PCR扩增”,且e的产生是T-DNA插入到基因E中,因此当拟南芥的基因型为EE时,用引物“Ⅱ+Ⅲ”组合,可以获得PCR产物,但用引物“I+Ⅲ”组合时,不能获得PCR产物;当拟南芥的基因型为Ee时,用引物“Ⅱ+Ⅲ”组合和引物“I+Ⅲ”...
STEP 03将T-DNA的名字输入方框里面，例如输入SALK_***，点Submit，就可以得到LP、RP的两条引物（红色方框里），蓝色方框里显示了相应片段的大小；STEP 04回到最开始打开网页的那个界面，找引物BP，如下图所示：红色框里的引物LBb1.3就是SALK类的T-DNA插入的BP通用引物。引物设计好之后，后面就是进行PCR扩增，分...
对于T-DNA插入型突变体的鉴定可以通过三引物法来实现。 2 三引物法鉴定突变体的原理 2.1 关于Ti质粒和T-DNA Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。人们根据这一现象,将Ti质粒...
实验五拟南芥TDNA插入突变纯合体的鉴定 实验目的 1．熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法；2．掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突 变体的方法。T-DNA插入鉴定的原理 突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列；2.T-DNA插入方向确实定；3.T-DNA插入位置确实定；4.引物设计；5.PCR扩增；6.电泳检测。T-...
图1结果鉴定图2PCR引物设计 三、 1、材料:T-DNA插入的突变拟南芥植株; 2、仪器:离心管,离心机,水浴锅,移液枪,PCR仪,电泳槽等; 3、试剂:液氮,CTAB提取液,氯仿/异戊醇(24:1),无水乙醇,70%乙醇,10xTaq buffer,MgCl2,引物,琼脂糖,溴化乙锭(EB)。 四、实验步骤 1、植物DNA提取方法(CTAB法) 1)水浴加热CTAB...
1. 为研究拟南芥植株E基因的功能,科研人员将T-DNA插入到E基因中,导致其发生突变,突变后的基因记为e。为验证某拟南芥植株的基因型,科研人员根据基因E和T-DNA的序列,设计了三种引物,引物的结合位置如图所示。已知完整的E基因和T-DNA整合后,因片段长度过大,不能完成整个融合基因的PCR扩增。科研人员提取该植株的总...
除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体,T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。 4、T-DNA插入突变体PCR鉴定 图1结果鉴定图2PCR引物设计 三、 1、材料:T-DNA插入的突变拟南芥植株; 2、仪器:离心管,离心机,水浴锅,移液枪,PCR仪,电泳槽等; 3、试剂:液氮...
实验设计思路和原理拟南芥的栽培拟南芥T-DNA插入突变体的PCR鉴定 实验设计的思路和原理 经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来 研究生命的发生与发展规律。一般是随机突变基因，从表型变化入手去研究和确定基因的遗传规律、结构特征、在染色体上的位置，并克隆基因的序列。反向遗传学则是在获得生物体基因组全部序列...