鉴定拟南芥T-DNA插入的突变体有专门的网站可以使用，它们分别是突变体突变信息查询网站，以及鉴定突变体的引物设计网站，具体的网站信息如下所示：突变信息查询网站：http://signal.salk.edu/cgi-bin/tdnaexpress/引物设计网站：http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 利用突变信息查询网站查询拟南芥T-DNA插入信...
它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP还能扩增出分子量较小的产物(小带);在...
T-DNA插入鉴定的原理 突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列;2.T-DNA插入方向的确定;3.T-DNA插入位置的确定;4.引物设计;5.PCR扩增;6.电泳检测,T-DNA插入基因的基因组序列 点击基因编号进入网页 点击sequenceviewer进入 点击nucleotideview进入 点击突变体编号后进入的网页 进入网站查找基因突变体及插入...
人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,获得转基因植株。 除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体,T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。 4、T-DNA插入突变体PCR鉴定 图1结果鉴定图2PCR引物设计 三、 ...
人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区,借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合,获得转基因植株。 除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体,T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。 4、T-DNA插入突变体PCR鉴定 图1结果鉴定图2PCR引物设计 三、 ...
模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定西南大学目录拟南芥的栽培拟南芥T-DNA插入突变体的PCR鉴定实验设计思路和原理实验设计的思路和原理经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研究生命的发生与发展规律。一般是随机突变基因,从表型变化入手去研究和确定基因的遗传规律、结构特征、在染色体上的位置,并克隆基因的序列。
HM(纯合子):两个等位基因上都有T-DNA插入,能被BP+RP扩出,而不能LP+RP扩出条带。 HZ(杂合子):两个等位基因中的一个有T-DNA插入,第9页/共23页 实验目的 1.熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法; 2.掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突变体的方法。第10页/共23页 野生型(Col)、ibm1突变体( SALK...
在PCR 鉴定方法中,首先需要设计一对特异性的引物,用于扩增 ATSUC3 插入突变体中的特定片段。引物设计需要考虑插入突变体的 序列特征和扩增片段的长度等因素,以确保引物的特异性和扩增效率。 然后,需要提取待鉴定植物的DNA,常用的方法是采用CTAB 法或试 剂盒提取法。提取的DNA 需要经过纯化和回收,以去除杂质和核酸...
拟南芥T-DNA插入突变体的PCR鉴定 2012.11.28 1 实验设计的思路和原理 经典遗传学是从生物的性状、表型到遗传物质来研 究生命的发生与发展规律。反向遗传学则是是在获得生物体基因组全部序列的 基础上，通过对靶基因进行必要的加工和修饰，如定点突变、基因插入\缺失、基因置换等，再按组成顺序构建含生物体必需元件...
除用于转基因以外,T-DNA插入到植物的基因中可引起基因的失活,从而产生基因敲除突变体,T-DNA大多为单拷贝插入,使其利于进行遗传分析。图1结果鉴定4、 T-DNA插入突变体PCR鉴定WTHZHM■■■ 900410+N*N=0 300图2PCR引物设计三、实验材料1、 材料:T-DNA插入的突变拟南芥植株;2、 仪器:离心管,离心机,水浴锅...