SSH 即抑制消减杂交技术是由Diatchenko 等于1996 年以m RNA 差别显示技术为基础建立起来的筛选未知差异表达基因的新技术。它主要基于最近出现的抑制PCR , 并结合标准化(normalization 或equalization ) 和消减杂交( substractive hybridization)。抑制PCR 通过利用含引物序列的双链接头(adaptor) 充当引物模板, 使两端接上...
抑制性消减杂交技术是一种以抑制性PCR 反应为基础,将标准化测试cDNA 单链步骤和消减杂交步骤合为一体的技术。通过合成两个不同的接头,接于经限制性内切酶消化后的测试cDNA 片段的5’末端,将测试和驱动进行两轮杂交。所谓抑制性PCR 是利用链内退火优于链间退火,使非目的序列片段两端的长反向重复序列在退火时产生...
抑制消减杂交技术,抑制消减杂交技术,该方法运用了杂交二级动力学原理,即高丰度的单链DNA在退火时产生同源杂交的速度快于丰度低的单链DNA,从而使原来在丰度上有差别的单链DNA相对含量达到基本一致。而抑制PCR则利用链内退火优于链间退火的特点,使非目的序列片段两端反向
ssh,抑制消减杂交(英语:suppression subtractive hybridization,简称为SSH)是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术。
抑制差减杂交(SSH)SSH是一种基于抑制PCR和差减杂交技术建立的,在转录水平上研究基因表达的技术。• 抑制性消减杂交—原理 杂交动力学 不同丰度的单链DNA得到均衡 抑制性PCR 目的基因得到富集 4 • 杂交动力学 抑制差减杂交技术运用了杂交二级动力学原理,即高丰度的单链cDNA在退火时产生同源杂交的速度快于低...
0引言rn抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术.其原理是以抑制性多聚酶链反应(PCR)反应为基础的cDNA消减杂交技术.通过合成两个不同的接头,连接于测试cDNA片段的5'末端,达到选择性扩增差异性表达的cDNA片段,抑制非目的cDNA的扩增.该技术与其他...
抑制消减杂交反应 将抗病和感病样本的双链 cDNA 分别作为 tester 和 driver。首先,对 tester cDNA 进行酶切处理,产生粘性末端。然后,将 tester 和 driver cDNA 进行两轮杂交。在杂交过程中,利用抑制消减杂交技术的原理,使差异表达基因在杂交过程中得到富集。具体而言,通过设计特定的引物和接头,使得只有在 tester...
抑制消减杂交法(SSH)是一种新的以PCR反应为基础的cDNA消减杂交方法。它是通过合成两个不同的接头,连接于经限制性内切酶消化后的cDNA片段的5’端,达到选择性扩增目的cDNA片段,同时抑制非目的cDNA的扩增。 其优点是: 1.可有效分离高、低丰度的差异表达基因。 2.技术方法简单,成熟,易操作。 3.灵敏度高。 4.重复...
1、主要 内内 容 抑制消抑制消减杂减杂交的定交的定义义 抑制消抑制消减杂减杂交的基本原理及交的基本原理及实验过实验过程程 抑制消减杂减杂交的定义义抑制消减杂减杂交的原理是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术.其原理是以和为基础的cDNA消减杂交技术.通过合成两个不同的接头,连接于测试cDNA片段的...