抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH) 是建立在抑制PCR 与消运用杂交二级动力学原理，减杂交技术相结合的基础上的更简单快速的分离差异基因的方法。即丰度高的单链DNA 在退火时产生同源杂交的速度快于丰度低的单链DNA，使原来在丰度上有差别的单链DNA 相对含量达到基本一致，利用链内退火优于链间...
在杂交过程中，利用抑制消减杂交技术的原理，使差异表达基因在杂交过程中得到富集。具体而言，通过设计特定的引物和接头，使得只有在 tester 中特异表达或高表达的基因片段能够在后续的 PCR 扩增中得到有效扩增，而共同表达的基因则被抑制。消减文库构建与克隆筛选 经过杂交和 PCR 扩增后，将获得的差异表达基因片段与合适...
抑制消减杂交法(SSH)是一种新的以PCR反应为基础的cDNA消减杂交方法。它是通过合成两个不同的接头,连接于经限制性内切酶消化后的cDNA片段的5’端,达到选择性扩增目的cDNA片段,同时抑制非目的cDNA的扩增。 其优点是: 1.可有效分离高、低丰度的差异表达基因。 2.技术方法简单,成熟,易操作。 3.灵敏度高。 4.重复...
抑制性消减杂交技术自1996年报道以来, 该技术已被多名研究者采用, 并与其他分子生物学技术相结合, 克隆了多种新基因. 在慢性肝炎、肝纤维化和肝细胞癌的发生发展中基因调控的研究应用. 乙型肝炎、丙型肝炎慢性化机制目前尚不清楚, HBV、HCV进入肝细胞后, 病毒基因组表达的反式激活蛋白对肝细胞基因组具有反式调节...
抑制性消减杂交技术是一种以抑制性PCR 反应为基础，将标准化测试cDNA 单链步骤和消减杂交步骤合为一体的技术。通过合成两个不同的接头，接于经限制性内切酶消化后的测试cDNA 片段的5’末端，将测试和驱动进行两轮杂交。所谓抑制性PCR 是利用链内退火优于链间退火，使非目的序列片段两端的长反向重复序列在退火时产生...
阻抑消减杂交，抑制消减杂交 阻抑消减杂交,抑制消减杂交是2010年公布的海峡两岸遗传学名词。 公布时间 2010年全国科学技术名词审定委员会审定公布的海峡两岸遗传学名词。出处 《海峡两岸遗传学名词》。
1、主要 内内 容 抑制消抑制消减杂减杂交的定交的定义义 抑制消抑制消减杂减杂交的基本原理及交的基本原理及实验过实验过程程 抑制消减杂减杂交的定义义抑制消减杂减杂交的原理是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术.其原理是以和为基础的cDNA消减杂交技术.通过合成两个不同的接头,连接于测试cDNA片段的...
在基因分离与克隆中,构建各种eDNA文库是近些年发现新基因及研究基因功能常用的基础工具之一。其中,抑制性消减杂交技术(SSH)是一种高效分离差异表达基因的方法,在分离筛选细菌活的非可培养状态(VBNC)与正常菌株差异基因中,应用这种研究方法是研究细菌VBNC状态菌株毒力、致病性和耐药性及菌株遗传分化关系的重要途径。文章...
解析 抑制性消减杂交与传统的新基因克隆方法相比,具有敏感性高,假阳性率低等特点,且有效地分离扩增低丰度特异表达的基因,另外实验周期短、易操作,熟练者能在7~14天内构建成消减文库,获得差异表达基因,且其费用又大大低于基因芯片,并能克隆出新的疾病相关基因,这些优点使得此项技术自一建立就受人们的广泛关注。