1 qPCR仪器工作原理 qPCR仪器是由荧光定量系统和计算机组成,主要包括这三个反应模块:激发光发射源,接收装置,PCR反应模板。在PCR反应模块中进行qPCR反应,当仪器的激发光发射源发出一定波长的光线,遇到qPCR反应体系中的荧光基团则会反射另外一个波长的光线,此时被接收装置实时接收,接收的数据传送至计算机,计算机...
翌圣生物作为研发qPCR试剂的资深厂家,匠心研发了一款高性能qPCR预混液——Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix,可以一次性解决上述实验烦恼。其中Universal ROX替代了传统ROX,弥补不同仪器平台的光程差,实现了适合所有qPCR仪器。另外,产品采用抗体法修饰,同时配方添加了基因扩增的促进因子,产品的扩...
最近在做RT 老板打算买个自己的qPCR的仪器 (有个公用,但买个放自己实验室比较方便)在bio rad官网让他们发qPCR system的报价结果周三了还没收到早上刚想吐槽大公司的服务不好今天上午就接到他们的电话 先...
实时荧光定量PCR技术 实验原理 实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 RNA提取试剂盒 荧光定量PCR Mix TRIZOL dNTP 氯仿 逆转录酶MMLV 异丙醇 Taq酶 DEPC水 ddH2O TE MgCl2 琼脂糖 溴化乙锭 MOPS 甲醛 乙酸钠 EDTA...
图. 13775液体性能:对假病毒模板分别使用高灵敏度版RT-qPCR试剂13110(红色)和13775(蓝色)试剂进行多...
对于RT-PCR来说,它不仅仅只是逆转RNA,更对后续qPCR或其他实验的结果有着至关重要的作用,我们需要注意以下几点: 1.提取RNA后并检测其质量 对RNA质量的检测包含RNA完整度测定及RNA产量测定两部分: (1)RNA的完整度对cDNA的合成结果会产生重要的影响。 通过琼脂糖凝胶电泳进行检测是方法之一,这也是一般实验室最常用的...
其次,在通过判断qPCR仪器(不同仪器有的需要ROX染料、Low ROX染料、High ROX染料进行校正,有的不需要),选择合适的qPCR试剂。最后,进行实验验证qPCR产品的的扩增效率、扩增曲线、灵敏性、特异性、稳定性等性能。这样才能很好挑到合适又实用的qPCR产品,同时最主要的还是考虑性价比,毕竟做科研真的很耗经费。小编通过实践...
RT的时候多加点模板,少加点水就行了,不知道你用的是什么仪器测得rna,我们实验室的测RNA的仪器很不...
对于RT-PCR来说,它不仅仅只是逆转RNA,更对后续qPCR或其他实验的结果有着至关重要的作用,我们需要注意以下几点: 1.提取RNA后并检测其质量 对RNA质量的检测包含RNA完整度测定及RNA产量测定两部分: (1)RNA的完整度对cDNA的合成结果会产生重要的影响。 通过琼脂糖凝胶电泳进行检测是方法之一,这也是一般实验室最常用的...
通过上期《手把手教你做出RT-qPCR最美曲线系列:如何评估RNA质量?》一文的学习。相信大家已经获得了优质的RNA,即将进入逆转录环节。 对于逆转录,大家都知道它是以RNA为模板,在逆转录酶的作用下,合成互补DNA (complementary DNA,cDNA)的过程(如图1)。但对于过程中起关键作用的逆转录酶,可能比较陌生。接下来,让小翌给...