其基本原理是通过两轮PCR反应,将两个具有重叠序列的引物引导下的DNA片段进行扩增,并在扩增过程中通过引物设计实现特定的基因改造。 在重叠延伸PCR中,引物设计是关键步骤之一。首先,需要设计两对引物,分别命名为引物A和引物B。引物A和引物B的设计原则是:引物A和引物B的5'端都包含所需改造的目标序列,而3'端则包含...
重叠延伸PCR技术是设计含突变点碱基的互补核苷酸片段的引物,在PCR过程中,互补的核苷酸片段形成重叠,重叠的部分互为模板,通过多次PCR 扩增,从而获得突变基因的方法。科学家将枯草芽孢杆菌基因组上的甘油激酶编码基因glpk的第270位氨基酸M突变为I,构建出了对甘油的利用水平大大提升的枯草芽孢杆菌,其原理如下图。请回答下...
重叠延伸PCR技术是常规PCR技术的衍生,它依据需要连接的基因中核苷酸序列(或基因片段)设计出多对具有互补末端的引物,先分段对模板进行扩增,再将PCR产物混合,其中的重叠链将相互搭桥、互为模板而延伸,最终实现不同来源的扩增片段重叠拼接起来的目的,如下图1所示。请分析并回答下列问题: ...
重叠延伸PCR技术是设计含突变点的互补核苷酸片段作为引物,在PCR过程中,互补的核苷酸片段形成重叠,重叠的部分互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得突变基因的方法。科研人员将枯草芽孢杆菌的甘油激酶的第270位氨基酸M突变为1,构建出了对甘油高效利用的枯草芽孢杆菌。下列说法正确的是( ) A.通过PCR1获得产物AB需要进行2轮...