依赖萤光素酶的化学发光特性，利用闪烁计数器可以对萤光素酶的活性定量检测。在标准条件下，底物过量时，固定时间内，萤光闪烁次数与样品中萤光素酶的活性成正比，因此可通过记录闪烁次数来评价萤光素酶的活性。另外,通过光自显影法也可以对萤光素酶进行定性检测。通用的方法还是通过萤光测定仪（化学发光仪）测定过程中...
萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)是最经典的萤光素酶,以萤光素(luciferin)为底物,催化反应依赖ATP,很适合作为遗传报告基因。 海肾萤光素酶(Renilla luciferase),底物是肠腔素(coelenterazine),只需要氧气,不需要ATP,发蓝色光。海肾萤光素酶是萤火虫萤光素酶的替代,并常与萤火虫萤光素酶组合成为双色检测,或者作为内...
海肾萤光素酶也是一种胞内蛋白,大小为36KDa。只需要氧气就可以催化腔肠素,氧化生成高能产物coelenteramide,并发出蓝光,其最强发光波长为465nm。 检测方法差异 对于萤光素酶的化学发光与检测模式上存在以下差异: •化学发光根据发光的形式和种类分为闪光型(flash-type)和辉光型(glow-type)两种类型; •在检测方法...
1.具有酶活性(信号放大能力 2.蛋白小 3.没有内源性表达，背景低 4.易于定量 5.高灵敏度、线性范围宽 6.反应迅速 三，萤光素酶 在生物医药行业最主要的报告基因为荧光素酶报告基因。最常见的荧光素酶 （luciferase）基因来源于萤火虫。萤火虫萤光素酶在ATP、氧气和Mg2+存在条件下，催化萤光素的氧化羧化，释放...
细胞萤光素酶报告基因检测受多种因素影响,例如载体状态,细胞状态,转染量,转染效率,裂解效率,加样精度等等,因此实验中一般需要做3个或以上复孔,且最好采用双萤光素酶报告基因,以保证实验结果的可信度。现将双萤光素酶实验检测中常见的问题汇总如下: Q1:如何选择载体?
萤光素催化酶是自然界中能够产生生物发光的酶的统称，其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyralis的萤火虫体内的萤光素催化酶。在相应化学反应中，荧光的产生是来自于萤光素的氧化，有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有酶的情况下，萤光素与氧气反应的速率非常慢，而钙离子的存在常常可以进一步加速...
细胞萤光素酶报告基因检测受多种因素影响,例如载体状态,细胞状态,转染量,转染效率,裂解效率,加样精度等等,因此实验中一般需要做3个或以上复孔,且最好采用双萤光素酶报告基因,以保证实验结果的可信度。现将双萤光素酶实验检测中常见的问题汇总如下: Q1:如何选择载体?
双萤光素酶报告基因检测试剂盒有3类主要用户群体，分别是：制药和生物技术公司：在药物开发过程中，这些公司可能会使用双荧光素酶报告基因检测试剂盒来评估药物对特定基因表达的影响，以及药物作用的分子机制 。学术和研究机构：大学和研究所中的科研人员经常使用这类试剂盒来进行基础生物学研究，探索基因功能和调控机制 ...