分子生物学实验技术——荧光素酶实验 乏善可陈 生物学 USTC 博士 212 人赞同了该文章 报告基因/报告基团(reporter):是一种可被实验仪器非常方便检测到的化学基团、蛋白质或酶以及编码它们的基因。reporter可以通过实验手段非常容易被鉴定与检测,因此在实验中广泛应用。 例如,荧光素酶报告基因实验中运用的荧光素酶基因,
荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中最有代表性的是来自北美萤火虫体内的荧光素酶(Firefly Luciferase)。萤火虫荧光素酶属于加氧酶，其发光反应需要O2和Mg2+参与；有辅酶A存在时能提高反应效率，增加发光时间。萤火虫荧光素酶无需翻译后修饰，即可表现出荧光素酶活性。活体成像技术原理：将...
💫荧光素酶(Luciferase):是能够催化底物氧化发光的一类酶的统称。 荧光素酶的种类很多,其中应用较为广泛的是萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase,FLUC)和海肾荧光素酶(Renilla luciferase,RLUC) 💫在ATP、Mg2+、O2存在的条件下,虫荧光素在虫荧光素酶的催化下氧化发光,发光颜色为黄绿色。 Luciferase报告基因系统是以...
本实验有多种名称:荧光素酶互补实验(Split-Luciferase Complementation Assay, LCA),萤火虫荧光素酶互补技术(Firefly luciferase complementation imaging assay, LCI),分裂荧光素酶互补成像(Split-LUC imaging),分裂荧光素酶互补实验,荧光素酶蛋白互补分析。 本实验可以借助于烟草(Nicotiana benthamiana)瞬时表达系统,以萤光...
1、 实验简介 Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的实验。荧光素底物会在荧光素酶作用下会发光（波长540-600nm），且光强能反应荧光素酶的表达量。荧光素酶的蛋白表达量与启动子活性、mRNA的稳定性及翻译效率相关。从而将待测启动子、UTR等序列与荧光素酶...
实验的基本原理 由于miRNA主要通过作用于靶基因的3’UTR起作用,可以将目的基因3’UTR区域构建至报告基因luciferase的后面,通过比较过表达或者干扰miRNA后,报告基因表达的改变(监测荧光素酶的活性变化)可以定量反映miRNA对目的基因的抑制作用。 进行验证实验...
双荧光素酶实验是一种基于荧光素酶（Luciferase）的生物发光检测技术，原理是利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点。该实验利用两种荧光素酶：萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase, F-Luc）和海肾荧光素酶（Renilla Luciferase, R-Luc），通过它们的活性来反映基因表达的变化和调控情况。01.两种酶的作用是什么...
荧光素酶(luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的总称,其中具有代表性的是从甲虫中分离得到的萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)和从海肾中分离得到的海肾荧光素酶(Renilla luciferase)。由于两种酶底物和发光颜色的区别,且在动物体内无内源性表达,使其在双报告实验中得到广泛应用。
双荧光素酶实验的原理是利用荧光素酶与底物结合发生化学发光反应的特点，把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在萤火虫荧光素酶基因（firefly luciferase）的上游，构建成荧光素酶报告质粒。然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响...
荧光素酶（Luciferase）是一种广泛应用于生物学研究中的酶类，它能够催化荧光素的氧化反应，产生强烈的荧光。荧光素酶报告实验是利用荧光素酶作为报告基因，通过其荧光产生的强度来检测目标基因的表达水平或者蛋白质相互作用等生物学过程。本实验旨在通过荧光素酶报告实验的方法和步骤，探究其在生物学研究中的应用及意义...