组织切片间期染色体荧光原位杂交染色体原位荧光分子杂交技术（ChromsomeAnalysisbyFluorescenceinsituHybridization）的发展为研究染色体上DNA的序列提供了一个最直接的方法。具有经济、安全、快速、稳定，灵敏度高等优点，多彩FISH可在同一核内显示两种或多种序列，还可对间期核染色体进行研究(图1)；应用不同的探针可显示某一...
基因定位是荧光原位杂交的最基础最成功的应用。利用荧光原位杂交灵敏、准确,并且可以一次检测多段基因等特点,可以确定目标基因的准确位置,确定几个基因之间的位置关系,以及基因与染色体端粒之间的关系,基因与着丝点的关系,是构建基因图谱的基本要素。目前荧光原位杂交技术...
5、将10μLDAPI复染剂滴于杂交区域，立即盖上盖玻片；6、暗处静置10min，最后使用荧光显微镜观察。最后，一般情况下经过5-7天，可以出具FISH诊断报告。总之，荧光原位杂交技术（FISH）具有稳定性好、操作安全、结果迅速、空间定位精确、一张玻片上可以使用多种颜色标记等优点。#广州华韵生物科技有限公司# ...
荧光原位杂交(FISH)是上世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。可用于检测基因扩增、基因缺失、基因断裂、基因融合、染色体数目异常。临床上具有指导治疗、辅助诊断、鉴别诊断和判断预后的作用。
荧光原位杂交,英文全称叫Fluorescence in situ hybridization,通常根据首字母简称FISH。 这项技术始于传统细胞遗传学同DNA技术相结合而开创的一门新学科——分子细胞遗传学技术。是二十世纪八十年代末期,在原有的放射性核酸探针原位杂交技术的基础上,发展起来的一种非放射性原位杂交技术。
一.荧光原位杂交原理 以半抗原如生物素、地高辛间接标记或以荧光素直接标记的已知核酸分子为探针,探针和靶序列双链DNA变性后杂交,互补的异源单链DNA分子在适宜的温度和离子强度下退火形成稳定的异源双链DNA,通过荧光标记的亲和素或抗地高辛抗体将半抗原显示出来,通过荧光显微镜观察杂交信号[1]。
荧光原位杂交技术根据碱基互补配对原则,通过变性复性使带有荧光物质的探针与目标DNA接合,最后用荧光显微镜即可直接观察目标DNA所在的位置。 通俗来说,原理是利用荧光标记的DNA探针与要检测的DNA或者RNA上的特定区域杂交。 √荧光:利用荧光素标记特异性的DNA片段(探...
荧光原位杂交探针的荧光标记可以采用直接和间接标记的方法。间接标记是采用生物素标记DNA探针,杂交之后用荧光素亲和素或者链霉亲和素进行检测,同时还可以利用亲和素-生物素-荧光素复合物,将荧光信号进行放大;直接标记法是将荧光素直接与探针核苷酸或磷酸戊糖骨架共价结合,或在缺口平移法标记探针时将荧光素核苷三磷酸掺...
荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）技术基于与任何DNA杂交方法相同的原理，该方法利用单链DNA与互补DNA退火的能力。在FISH的情况下，靶DNA可以是中期染色体、间期细胞核或组织切片，附着在玻璃显微镜载玻片上。FISH的出现代表了细胞遗传学领域的重要一步，现已被广泛用于研究和诊断。FISH相对于其他...