荧光原位杂交(FISH)的步骤主要包括以下几点: 探针变性:将探针在75℃恒温水浴中温育5分钟,然后立即置于0℃环境中5~10分钟,使双链DNA探针变性。 样本变性:将制备好的玻片样本置于50℃培养箱中烤片2~3小时,然后浸在70~75℃的体积分数70%甲酰胺/2×SSC中变性2~3分钟,之后依次经过70%、90%和100%冰乙醇脱水,每次...
荧光原位杂交听起来很复杂呢,其实操作步骤也有章可循啦。 一、样本准备。 要做这个实验,先得把样本处理好。如果是细胞样本的话,就得把细胞乖乖地固定在载玻片上,就像把小娃娃放在小床上一样安稳。这一步可不能马虎,固定不好后面就不好办啦。要是组织样本呢,得把组织切成薄片,薄到像纸片一样精致才行。然后同...
杂交:将已变性或预退火的探针10 μL滴于已变性并脱水的玻片标本上,盖上18×18盖玻片,用Parafilm封片,置于潮湿暗盒中37℃杂交过夜(为防止杂交液蒸发,此过程在湿盒中进行)。 洗涤:将已杂交的玻片标本放置于已预热42～50℃的体积分数50%甲酰胺/2×SSC中洗涤3次,每次5 min。然后在已预热42～50℃的1×SSC中洗涤...
1．取出探针，室温静置5分钟，上下颠倒混匀探针后短暂离心，取10μL滴于杂交区域，立即盖上与组织大小相符的盖玻片，并用橡皮胶封边；2．将玻片置于杂交仪上，85℃共变性5分钟，37℃杂交过夜。洗涤和复染 1、取出杂交后的玻片，去除盖玻片上的橡皮胶，将切片浸入2×SSC中约5秒，用镊子轻轻将盖薄片揭去；2、将...
实验步骤 一、实验材料准备 1.实验用具及材料 (1)人的 MyoD1(MYF3)基因探、人外周血中期染色体细胞标本; (2)指甲油、甲酰胺、氯化钠、柠檬酸钠、氢氧化钠、吐温 20 等; (3)恒温水浴锅、培养箱、染色缸、载玻片、Nikon E-400 荧光显微镜、盖玻片、封口膜、200μL移液器、暗盒等。
荧光原位杂交(FISH)是一种常用的分子生物学技术,用于检测特定DNA序列在细胞中的位置和数量。以下是详细的FISH步骤,帮助你轻松上手。🔍 杂交变性步骤: 1️⃣ 配制探针:在室温下,向离心管中依次加入7.0μl杂交缓冲液、1.0μl去离子水和2.0μl探针,充分混匀后离心3秒,转速为1000转/分钟。重复离心两次。
百度试题 题目荧光原位杂交的步骤包括(?) A.脱蜡B.预处理C.酶消化D.脱水,封片E.以上全是相关知识点: 试题来源: 解析 E 反馈 收藏
下面将详细介绍荧光原位杂交的具体步骤和相应的详细说明。 1.细胞准备 首先,需要准备细胞样本。可以选择使用原代细胞,细胞悬液或切片等。 2.固定 将细胞固定在载玻片或载玻片上面。固定通常使用的试剂是乙酸乙酯和甲醇的混合物,通常比例为1:3 3.水合 将载玻片中的组织或细胞水合处理。这一步可以通过将载玻片浸泡...
荧光原位杂交实验步骤 1)探针变性 将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5～10min,使双链DNA探针变性。 2)标本变性 ①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2～3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70～75oC的体积分数70%甲酰胺/2×SSC的变性液中...
荧光原位杂交(FISH)实验步骤仪器设备 1、医用微波炉; 2、水浴锅; 3、OLYMPUS BX51荧光显微镜; 4、OLYMPUS DP11数字显微照相机。 FISH试剂 (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀释而成,储存于4℃; (2)20×SSC(pH7.0); (3)2×SSC,由20×SSC溶液稀释而成; (4)25mg/ml蛋白酶K消化液。 (5)变性液(70%甲酰胺+...