设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3株的T7RNA聚合酶基因并连接真核表达载体,利用Lipo-fectamineTM2000将重组质粒转染BHK-21细胞,G418筛选2周后,转入验证质粒pT7-HN,经Western-blot和间接免疫荧光鉴定后证实获得了1株能稳定表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系.构建的VT7细胞系传30代还能够稳定的表达T7RNA聚合酶,为...
12、采用稳定表达t7 rna聚合酶的bhk-21细胞系为基础的体外rv拯救方法的建立是建立高效体外rv拯救系统的基础,因此,本发明所建立的稳定表达t7 rna聚合酶的bhk-21细胞系能够应用于拯救各种基因型的牛轮状病毒、稳定表达zsgreen的牛轮状病毒报告病毒、猴轮状病毒、猪轮状病毒或人轮状病毒等方面。 13、相应的,本发明...
聚合酶细胞系鉴定构建表达酶切 稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系的构建及鉴定母连志1,2,孙玉章1,2,丛彦龙1,2,李少丽1,2,张晓东1,2,王广美1,2,王晓莉1,2,丁壮1,2*(1.吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062;2.吉林大学人兽共患病教育部重点实验室,吉林长春130062)摘要:设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3...
细胞系聚合酶睾丸rnap表达egfp 稳定表达T7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系的建立收稿日期:2012-04-16基金项目:甘肃省科技计划项目(1008FCCA006);甘肃省科技计划项目(1104NKCA167)作者简介:祁光宇(1978-),男,助理研究员,硕士,研究方向为分子病毒学与免疫学。E-mail:qiguangyu0931@126.com*通讯作者:**荣,副研究员,研究...
设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3株的T7RNA聚合酶基因并连接真核表达载体,利用Lipo-fectamineTM2000将重组质粒转染BHK-21细胞,G418筛选2周后,转入验证质粒pT7-HN,经Western-blot和间接免疫荧光鉴定后证实获得了1株能稳定表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系.构建的VT7细胞系传30代还能够稳定的表达T7RNA聚合酶,为...
真核表达[目的]建立具有绿色荧光标记表达17 RNA聚合酶的稳定细胞系.[方法]从BL21(DE3)大肠杆菌中克隆出17 RNAP基因,定向克隆质粒FG12后,构建了表达T7 RNA聚合酶基因(T7)的Lenti-virus重组质粒FG12-T7 RNAP.用此重组质粒转染293T细胞,WB可检测出瞬时表达的T7 RNAP蛋白;利用辅助质粒对表达,T7的非复制型...
T7RNAP真核表达[目的]建立具有绿色荧光标记表达T7 RNA聚合酶的稳定细胞系.[方法]从BL21(DE3)大肠杆菌中克隆出T7RNAP基因,定向克隆质粒FG12后,构建了表达T7 RNA聚合酶基因(T7)的Lenti-virus重组质粒FG12-T7 RNAP.用此重组质粒转染293T细胞,WB可检测出瞬时表达的T7 RNAP蛋白;利用辅助质粒对表达T7的非...
T7 RNAP真核表达[目的]建立具有绿色荧光标记的表达T7RNA聚合酶的稳定细胞系.[方法]从BL21(DE3)大肠杆菌中克隆出T7RNAP基因,定向克隆进质粒FG12后,构建了表达T7RNA聚合酶基因(T7)的Lenti-virus重组质粒FG12-T7RNAP.用此重组质粒转染293T细胞,WB可检测出瞬时表达的T7RNAP蛋白;利用辅助质粒对表达T7的非...