本发明的dsRNA副产物降低的T7RNA聚合酶突变体比野生型T7RNA聚合酶更适用于体外转录体系,副产物极低,纯度更高,经过简单纯化即可满足RNA药物或mRNA疫苗要求,能极大降低下游纯化操作难度及成本,且转录产物质量高,具有更低的免疫副作用.本发明的T7RNA聚合酶突变体可能还包括以下一个或多个性能:更高的产物完整度,更高...
t7-rna聚合酶突变体,从seqidno.1所示的野生型t7-rna聚合酶的氨基酸序列的n端开始第43位的丝氨酸被酪氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、赖氨酸或天冬氨酸替代的突变体。 申请人通过噬菌体辅助的定向进化(pace)系统对t7-rna聚合酶转录跨过t7的一类终止子t7tφ的能力进行了筛选(esveltetal.,2010),含有终止能力降低的突变...
,精氨酸,天冬酰胺,谷氨酰胺,谷氨酸或脯氨酸.上述这种T7RNA聚合酶突变体适合内部含有终止信号的RNA以及末端形成发夹结构的RNA的合成,在体外转录,RNA合成,基因编辑,RNA药物合成,体内蛋白质表达或无细胞蛋白表达体外翻译系统,转录终止子研究,RNA依赖的RNA聚合酶活性研究,生物学转录调控元件合成等方面均能具有广泛应用....
7、a4:将a1-a3中任一所述的氨基酸序列的n端或/和c端连接标签或酶切位点得到的融合蛋白质,该标签或酶切位点不影响t7 rna聚合酶突变体的功能。 8、优选的,所述t7 rna聚合酶突变体,为如下a1-a4中任一所述的蛋白质: 9、a1:在氨基酸序列如seq id no.1所示的野生型t7 rna聚合酶的如下一个或至少两个位...
1、本发明的目的是提供一种t7 rna聚合酶突变体。 2、本发明采用的技术方案为: 3、一种t7 rna聚合酶突变体,为如下a1-a4中任一所述的蛋白质: 4、a1:在氨基酸序列如seq id no.1所示的野生型t7 rna聚合酶的如下一个或至少两个位置发生氨基酸替换的蛋白质:i6、f11、i19、k60、n67、a70、i82、n86、d87...
本发明公开了一种适合体外合成RNA的T7RNA聚合酶突变体及其应用,涉及核酸工具酶与核酸生物领域.本发明提供的T7RNA聚合酶突变体是将野生型T7RNA聚合酶从N端开始第173位氨基酸(精氨酸)用丙氨酸或组氨酸替代后得到的,即R173A和R173H.上述T7RNA聚合酶突变体适用于序列内部含Ⅱ类转录终止信号(核心序列为5'AUCUGUU3')...
本发明公开了一种具有高转录活性的T7RNA聚合酶突变体及其应用,属于生物技术领域.本发明对原始T7RNA聚合酶进行改造,构建得到的T7RNA聚合酶突变体相对于野生型T7RNA聚合酶,具有转录效率高,合成产量高,纯度高,特异性强,贮藏稳定性好等优点.适于将T7RNA聚合酶突变体制备成RNA转录试剂盒,用于RNA疫苗和药物,体外转录,...
本发明公开了一种具有高热稳定性的T7RNA聚合酶突变体及其应用,涉及生物技术领域,包括突变体C125A,C216L,Q269M,C347L,M401K,W422F,Y457L,G464M,A468F,F481W,Q505A,C510E,C515P,V567P,V687E,M696A,A703T,H772K,P780K,R792M,H799G,K801G,E830G,C839N,P865L或/和A881F;其氨基酸序列分别如SEQ...