稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系的构建及鉴定母连志1,2,孙玉章1,2,丛彦龙1,2,李少丽1,2,张晓东1,2,王广美1,2,王晓莉1,2,丁壮1,2*(1.吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062;2.吉林大学人兽共患病教育部重点实验室,吉林长春130062)摘要:设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3株的T7RNA聚合酶基因并连接真核...
试验结果表明,稳定表达t7 rna聚合酶的bhk-21-t7细胞系或单克隆细胞株的构建是rv高效反向遗传系统的关键。 12、采用稳定表达t7 rna聚合酶的bhk-21细胞系为基础的体外rv拯救方法的建立是建立高效体外rv拯救系统的基础,因此,本发明所建立的稳定表达t7 rna聚合酶的bhk-21细胞系能够应用于拯救各种基因型的牛轮状...
T7RNA聚合酶克隆VT7细胞系病毒拯救设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3株的T7RNA聚合酶基因并连接真核表达载体,利用Lipo-fectamineTM2000将重组质粒转染BHK-21细胞,G418筛选2周后,转入验证质粒pT7-HN,经Western-blot和间接免疫荧光鉴定后证实获得了1株能稳定表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系.构建的VT7细胞系传30...
设计1对特异性引物扩增痘苗病毒VTF7-3株的T7RNA聚合酶基因并连接真核表达载体,利用Lipo-fectamineTM2000将重组质粒转染BHK-21细胞,G418筛选2周后,转入验证质粒pT7-HN,经Western-blot和间接免疫荧光鉴定后证实获得了1株能稳定表达T7RNA聚合酶的VT7细胞系.构建的VT7细胞系传30代还能够稳定的表达T7RNA聚合酶,为...