(3) '5000 rpm,离心5 min集菌,用BY-2液体培养基重悬菌体,OD为0.5左右,待用。 3.农杆蔺介导的烟草BY-2悬浮细胞的外源基因转化 (1)取生长到第3或4天的BY-2细胞4 ml,加入上述备用的农杆菌液100ul,共培养3天; (2) 500 g离心2 min,收获细胞并用BY-2液体培养基(Amp 500 mg/L)洗3次: (3)将细胞...
烟草BY2细胞(Nicotiana tabacum L.cv Bright Yellow2,BY2)是一个非常重要且用途广泛的细胞系。它由Kato等于1972分离得到[1],在现有已建立的成熟植物细胞系中被认为是植物细胞中的Hela细胞。BY2细胞可以比较容易的转化外源基因[2],且转基因细胞团和悬浮培养细胞都较易得到。此外,该细胞系具有高度的同一...
A. BY-2细胞所用培养基成分明确,细胞培养条件简易,继代培养操作简单,便于大规模培养。 B. 以烟草BY-2细胞为受体材料,利用不同的转基因方法。较容易筛选并获得稳定或瞬时转化外源基因的转基因细胞系。 C. 悬浮培养的烟草BY-2细胞均一性好,细胞形态和细胞团大小大致相同。 D. 烟草BY-2细胞悬浮培养时生长速度非...
2 悬浮细胞 ( Nicotiana tabacum L .CV Bright Y ellow) 继代培养在 改良 MS 培养基上. 每周 将 1 mL 生长 7 d 的细胞转至 50 mL 新鲜培养基 中, 25 ±2 o C 下黑暗条件培养 , 摇床转速为 130 rpm. 1. 2鬼笔环 肽 荧光探 针标 记微 丝 骨架 取活体 细胞 荧光 标 记缓 冲液 ( LSB :...
用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后对其分布的影响.结果表明:激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的均匀...
用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后对其分布的影响.结果表明:激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的...
裸露出来的叶肉面与酶液 本研究以分离的烟草 BY一2悬浮培养细胞 接触,按照 1g叶片加入 10mI酶解液的比例进 和蚕豆叶肉细胞原生质体为实验材料,应用激 行酶解.酶解液组成为:1.5 纤维素酶 (Cellulase 光共聚焦显微镜观察经鬼笔环肽荧光染色 的2 R_10,YakuhHonsha,Tokyo,Japan),0.3 离 种原生质体微丝骨架空问...
NO是一种重要的生物活性气体和功能分子。在植物遭受生物和非生物胁迫下,包括重金属Cd2+时NO作为信号分子起作用。Cd2+是一种非必需和有毒的重金属,能够引起植物的细胞程序性死亡(PCD)。 中国科学家使用非损伤微测技术等方法研究了烟草BY-2细胞暴露在150µM的CdCl2中出现PCD的调节因素。发现Cd2+诱导PCD出现时伴随...
A、悬浮培养的烟草BY-2细胞均一性好,细胞形态和细胞团大小大致相同。 B、悬浮细胞系外观为大小均一的小颗粒, C、烟草BY-2细胞悬浮培养时生长速度非常快,增殖周期约13.5h,1周内细胞数目可以增加80-100倍。 D、BY-2细胞所用培养基成分明确,细胞培养条件简易,继代培养操作简单,便于大规模培养。
只有当烟草'BY-2'('Bright Yellow',品种名)悬浮细胞密度高于某个阈值时细胞才能正常生长和增殖,在其培养液中添加适量的条件培养基(conditioned medium,CM),细胞却能正常生长和增殖,而且细胞增殖的速率与培养液中CM的含量在一定范围内呈正相关.把化学合成的植物磺肽素添加到'BY-2'悬浮细胞培养液中,细胞的增殖效应...