(3) '5000 rpm,离心5 min集菌,用BY-2液体培养基重悬菌体,OD为0.5左右,待用。 3.农杆蔺介导的烟草BY-2悬浮细胞的外源基因转化 (1)取生长到第3或4天的BY-2细胞4 ml,加入上述备用的农杆菌液100ul,共培养3天; (2) 500 g离心2 min,收获细胞并用BY-2液体培养基(Amp 500 mg/L)洗3次: (3)将细胞...
中应用 烟草 BY一2悬浮细胞 (Nicotianatabacum L.CV 最为普遍 ,后来随着鬼笔环肽 (Phalloidin)荧光探 BrightYellow)继代培养在改 良MS培养基上.每周 针技术 以及绿色荧光蛋 白(GFP)融合技术 的发 将 1mL生长7d的细胞转至50mL新鲜培养基 中, 展一,使得人们对活体细胞 内微丝骨架 的分布及 25±2oC下黑暗...
烟草BY2细胞(Nicotiana tabacum L.cv Bright Yellow2,BY2)是一个非常重要且用途广泛的细胞系。它由Kato等于1972分离得到[1],在现有已建立的成熟植物细胞系中被认为是植物细胞中的Hela细胞。BY2细胞可以比较容易的转化外源基因[2],且转基因细胞团和悬浮培养细胞都较易得到。此外,该细胞系具有高度的同一...
2 悬浮细胞 ( Nicotiana tabacum L .CV Bright Y ellow) 继代培养在 改良 MS 培养基上. 每周 将 1 mL 生长 7 d 的细胞转至 50 mL 新鲜培养基 中, 25 ±2 o C 下黑暗条件培养 , 摇床转速为 130 rpm. 1. 2鬼笔环 肽 荧光探 针标 记微 丝 骨架 取活体 细胞 荧光 标 记缓 冲液 ( LSB :...
用基因枪法将DREB基因和诱导型启动子rd29B构建的载体pBAC128F转入烟草悬浮细胞.通过除草剂抗性筛选,PCR和PCR-Southern检测,获得转DREB基因的细胞系.以300mmol·L-1NaCl和15%PEG6000处理14d后,转基因细胞系存活并生长,而野生型则接近死亡.转基因细胞系的脯氨酸含量和超氧物歧化酶活性普遍高于野生型的,而丙二...
裸露出来的叶肉面与酶液 本研究以分离的烟草 BY一2悬浮培养细胞 接触,按照 1g叶片加入 10mI酶解液的比例进 和蚕豆叶肉细胞原生质体为实验材料,应用激 行酶解.酶解液组成为:1.5 纤维素酶 (Cellulase 光共聚焦显微镜观察经鬼笔环肽荧光染色 的2 R_10,YakuhHonsha,Tokyo,Japan),0.3 离 种原生质体微丝骨架空问...
A. BY-2细胞所用培养基成分明确,细胞培养条件简易,继代培养操作简单,便于大规模培养。 B. 以烟草BY-2细胞为受体材料,利用不同的转基因方法。较容易筛选并获得稳定或瞬时转化外源基因的转基因细胞系。 C. 悬浮培养的烟草BY-2细胞均一性好,细胞形态和细胞团大小大致相同。 D. 烟草BY-2细胞悬浮培养时生长速度非...
用酶解法分别制备烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,应用激光共聚焦显微镜观察经TRITC-鬼笔环肽荧光染色的2种原生质体的微丝骨架空间分布,以及观察用10和20μmol·L-1微丝抑制剂latrunculin B分别处理2种原生质体后对其分布的影响.结果表明:激光共聚焦显微镜清楚地显示出2种细胞原生质体中微丝精细排列的均匀...
【摘要】微丝骨架是细胞骨架的重要成员,在细胞的多项生理活动中发挥着重要作用.本论文利用荧光标记鬼笔环肽技术和GFP融合蛋白技术,对活体烟草BY-2悬浮细胞中微丝骨架的标记方法进行了探索,结果表明,10nmol/L的Alexa488-Phalloidin为细胞微丝骨架标记的最佳浓度,利用PCR等技术构建pPZP-NtFABD2-GFP植物表达载体后,转化烟草...
求助烟草BY-2细胞 只看楼主 收藏 回复微笑像暖暖 登高必自 1 请问哪个实验室有烟草BY-2细胞,可以购买一点吗 微笑像暖暖 登高必自 1 顶 微笑像暖暖 登高必自 1 顶 微笑像暖暖 登高必自 1 顶 微笑像暖暖 登高必自 1 顶