🔢 第一步:细胞计数与悬液制备 首先,使用细胞计数仪计算细胞数量,并制备细胞悬液。将培养瓶中的细胞转移到ep管中,离心(900rpm,5min)后去除上清液。使用1ml培养基重悬细胞,取10微升进行计数。根据计数结果,制备所需浓度的细胞悬液。📊 第二步:细胞铺板与接种 在96孔板的最外围加入100微升PBS,以减少边缘挥发...
时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等情况而定（一般情况下，白细胞较难显色，因此需要较长的CCK-8反应时间或增加细胞数量 (～105个细胞/孔)。悬浮细胞较贴壁细胞难显色。对于悬浮细胞，在加入CCK-8孵育1～4小时后，可先从培养箱中取出，目测染色程度或用酶标仪测定决定CCK- 8最佳孵育时间。若显色困难，可...
其工作原理为在电子耦合试剂存在的情况下,WST-8这一物质可以被线粒体脱氢酶还原成橙黄色的甲臜产物,且其颜色深浅与细胞增殖程度成正比,与细胞毒性程度成反比。 实验步骤 1)制备细胞悬液:若为悬浮细胞则直接离心收集对数生长期的细胞;若为贴壁细胞则用胰酶消化后离心...
在活细胞线粒体内，脱氢酶能将WST-8还原为橙黄色的甲臢产物（Formazan），该产物的生成量与活细胞数量成正比。对于悬浮细胞而言，由于细胞不贴壁，直接利用CCK-8进行检测时，需确保细胞均匀分散于培养基中，以便准确反映细胞增殖情况。### 二、实验材料与方法### 实验材料- CCK-8试剂盒- 悬浮细胞系（如白血病细胞...