实验一:细胞增殖分析 1)制备细胞悬液,计数。 2)在96孔板中接种细胞悬液,每孔约100μl,同样的样本可做3个重复。 3)将培养板放入培养箱中预培养一段时间(37℃, 5%CO2),细胞贴壁需要大约2-4h,如果是悬浮细胞,该步骤可以省去。 4)每孔各加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔...
加CCK-8试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的残留,加入CCK-8试剂后轻轻震培养板,为了避免加样时由于CCK-8 残留在枪头或壁上上所带来的误差。 10. CCK-8反复冻融会增加背景值,干扰实验测定。 11. 设置实验孔 (含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) 阴性对照孔 (含有细胞的培养基、CCK-8、不含待测物质)...
A:将不含细胞的待测溶液孔中加入 10 μL CCK-8 溶液,孵育 1-4 h 后,测定在 450 nm 处的空白吸光度。若测得的吸光度很小,则说明含有较少的还原剂,正式实验可以直接加入 CCK-8 进行检测;若测得的吸光度相对较大,则说明存在较多还原剂,正式实验时需去除培养基,将细胞洗涤两次后,再加入新的培养基和 10...
01实验分组（每组建议3-6个复孔）实验组：药物或者基因过表达等处理细胞+CCK-8试剂（见下表黄色列）对照组：不加药物等的对照细胞+CCK-8试剂（见下表绿色列）空白组：不加细胞的空白培养基+CCK-8试剂（见下表蓝色列）PBS孔：灰色，防止液体过度蒸发排版参考：02实验方案 1.种板细胞数：细胞增殖实验：每孔加...
1. 与MTT相比,CCK-8和XTT的价格比较贵; 2. CCK-8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。 表1:几种细胞增殖/毒性检测方法的比较 普遍认为,CCK-8是操作更简单、数据更稳定、灵敏度也较高的细胞增殖与毒性检测方法。CCK-8实验过程简单总结为配置细胞悬液、加入待测...
4、CCK-8 的实验方法与步骤 应用场景一：细胞活性检测 1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，96孔板每孔加入 100ul， 使待测细胞密度为1,000～10,000细胞/孔。2. 5% CO2，37℃ 培养细胞 24 小时（培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少进行调整）。3. 每孔加入10ul CCK-8 溶液。如果...
CCK-8(Cell Counting Kit-8)实验步骤 原理:CCK-8试剂盒中的WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)是一种黄色化合物,它在电子耦合试剂1-Methoxy PMS(1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色...
(4)可能是加入的CCK-8试剂微量没有加准。为避免这种情况,可以直接配制含10% CCK-8的培养基,以换液的形式加入96孔板中,每孔100μl。 计算方法 细胞抑制率 =(对照-实验)/(对照-空白)×100% 对照:具有细胞、培养基、CCK-8的孔的OD值 实验:具有细胞、培养基、CCK-8和药物溶液的孔的OD值 ...
步骤:首先制作标准曲线(测定细胞具体数量);其次进行细胞活性检测;最后进行细胞增殖-毒性检测。注意事项:先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。 一. 制作标准曲线(测定细胞具体数量) 1、首先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞到培养板内。
CCK-8全称Cell Counting Kit-8,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性高灵敏度检测的试剂盒。WST-8是一种类似于MTT的化合物,可以被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物(检测波长450nm)。活细胞数量越多,线粒体脱氢酶产生的橙黄色甲瓒产物越多,颜色的深浅与活细胞的数量成正比。因此...