计数悬浮细胞,并根据实验需要调整细胞浓度。将细胞悬液加入到96孔板中,每孔体积约为100μL,通常每个样本设置3个重复孔。预培养:将含有细胞的96孔板放入37°C、5% CO2的培养箱中预培养,以促进细胞适应环境和贴壁(如果细胞为贴壁型)。对于悬浮细胞,这一步可以省略。加入CCK-8试剂:向每个孔中加入10μL的CCK...
CCK-8(Cell Counting Kit-8)是一种常用于细胞增殖和细胞毒性检测的试剂盒,它包含的WST-8试剂在细胞内线粒体的脱氢酶作用下被还原,生成水溶性的橙黄色甲臜产物,其数量与活细胞数量成正比。CCK-8检测法适用于悬浮细胞,因为生成的甲臜产物是水溶性的,不需要换液,对细胞的毒性小,且操作简便.实验步骤 细胞...
加药后,将96孔板放入培养箱中,继续孵育24小时或48小时。📊 第六步:加入CCK-8并测量OD值 在避光条件下,使用电枪设置好20ul参数后,每孔加入20ulCCK-8(浓度为10%)。加完后放入培养箱中等待4小时,然后使用酶标仪测量OD值(避光进行)。通过以上步骤,你就可以完成CCK-8实验,了解药物对悬浮细胞的影响啦!🎉0 0 ...
8. 如果实验中待测物质有氧化还原剂,在不含细胞的培养基中加入药物,然后加入CCK-8 试剂在一定时间内检测,和不加药物的培养基进行比较 (只加 CCK-8 试剂),如果 OD 值明显偏高,则说明有反应,正式检测时则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基和10ul CCK-8进行检测。9. 加 CCK...
(5)如果待检测物质有氧化性或还原性,在加入CCK-8之前要更换新鲜培养基,以去掉待测物质的影响。如果影响比较小或者没有影响,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。 (6)正常显色时间为1-4h,可以每半小时测定一次OD值,使其OD值保持在1-2之间...
其中,CCK-8(Cell Counting Kit-8)作为一种广泛应用于细胞增殖和毒性检测的试剂盒,因其操作简便、灵敏度高、对细胞毒性低等优点,成为了悬浮细胞实验中不可或缺的一部分。本文将深入探讨CCK-8实验在悬浮细胞培养中的应用,包括实验原理、步骤、注意事项以及数据分析,旨在为研究者们提供一份详尽的操作指南。###...
MT T 法和C C K-8法检测悬浮细胞增殖的比较 侯春梅,李新颖,叶伟亮,曹曦元,肖 鹤,黎 燕 (军事医学科学院基础医学研究所,北京 100850) 在细胞学实验中,M T T 比色法和3H -T D R 掺入法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因M T T 法具有简便、经济、安全等特点,而被广泛使用,但其操作...
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