4.一般siRNA需设计2-4条,另需要对照1-2条,序列设计完成后需要在BLAST中(BLAST: Basic Local Alignment Search Tool (http://nih.gov)进行比对,选择与靶基因特异性结合的序列进行合成即可。 上述原则是在设计siRNA时可以选择的一些参数,此外还有较为细节的原则如siRNA序列选择的位置、开始的碱基及序列及避免碱基单一...
若确定转染效果尚佳，其他因素也分析没有问题的情况下，却没有达到理想的基因沉默效果，则可以尝试更换其他siRNA来测试。由于RNA本身序列特性，或者靶位点的二级结构复杂等因素，有些siRNA的基因沉默效果可能没有那么显著，这种情况下可以尝试更换siRNA。6. 其它原因 如目的基因的表达调控特性导致其难以沉默，并已排除转染...
在肿瘤治疗中，高纯度无菌 siRNA 可以作为一种潜在的治疗手段。通过设计针对肿瘤相关基因的 siRNA，可以特异性地抑制肿瘤细胞的生长和增殖。例如，针对肿瘤细胞中的癌基因、抗凋亡基因或血管生成因子等设计 siRNA，可以抑制肿瘤的生长、诱导肿瘤细胞凋亡或抑制肿瘤血管生成，从而达到治疗肿瘤的目的。遗传性疾病治疗 对于一些...
也就是说,一旦有一条成功的siRNA引导链生成,它就像“永动机”一样的源源不断的不断沉默目标基因的表达,而不需要重复前面第一步。 而我们每个人自打出生,体内能行使功能的基因就高达两万多个,但我们需要知道的是,并不是所有的基因都对人有益处。 比如当你的某个基因从父母那里携带了不好的遗传缺陷(遗传性疾病)...
siRNA即小干扰RNA（Small interfering RNA），是一类长度为21-25 bp的双链RNA（dsRNA）分子，已广泛用于RNA干扰（RNAi）技术，通过引起同源mRNA发生高度特异性降解，实现RNA转录后抑制特定基因的表达。通过外源性或内源性的双链RNA（dsRNA）在细胞内被Dicer酶（核糖核酸内切酶）切割，产生具5’单磷酸和3’羟基末端，...
1. 设计siRNA序列 选择靶点： 通过生物信息学工具分析目标基因的序列，选择能够特异性靶向该基因的siRNA序列。避免副作用： 确保siRNA序列不会靶向其他非预期的基因，以减少副作用。2. 合成siRNA 化学合成： 使用化学合成方法，合成设计好的siRNA序列。纯化： 对合成的siRNA进行纯化，以去除杂质和不纯物。3. 转染siRNA...
诺贝尔奖获得者发现了这种被称为RNA 干扰 (RNAi) 的自然发生机制，为设计和使用合成 siRNA 作为疗法、以通过靶向其相应的 mRNA 来减少或消除疾病相关蛋白的表达创造了可能性。siRNA 可以针对两大类疾病相关基因。一类由直接引起或驱动疾病的基因组成；沉默这些基因通过靶向其来源以治疗疾病。第二类由不一定驱动疾病、但...
siRNA靶向基因沉默的机制可以分为三个主要的步骤:siRNA的合成与运输、RISC复合物的组装以及基因沉默。 首先,siRNA的合成与运输是整个过程的起点。siRNA可以通过合成或者从外源性源头获取。无论是通过合成还是外源性获取,siRNA都需要通过细胞膜进入到细胞质中。通常情况下,siRNA会与载体结合形成复合物,通过细胞膜的内吞作...
pcDNA3.1(+)是哺乳动物细胞表达载体,siRNA是用于RNA干扰的一段长约21-25nt并且和靶基因mRNA的某段序列互补的序列,用于在转录后水平上沉默基因.所以这个“pcDNA3.1(+)-靶基因-siRNA”很可能是一个用于gene knockdown的质粒.结果一 题目 pcDNA3.1(+)-靶基因-SiRNA是什么啊? 答案 pcDNA3.1(+)是哺乳动物细胞表达载...
siRNA表达载体的优点在于可以进行较长期研究——带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星期甚至更久。 病毒载体也可用于siRNA表达,其优势在于可以直接高效率感染细胞进行基因沉默的研究,避免由于质粒转染效率低而带来的种种不便,而且转染效果更加稳定。