原位杂交(in situ hybridization)将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交。使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。其...
原位杂交技术(In situ hybridization,ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。1969年美国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,将该基因进行定位,与此同时Buongiorno-Nardelli和Amaldi等(1970)相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位...
原位杂交组织化学技术(in situ hybridization histochemistry;ISHH) 简称原位杂交,是一种在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术,敏感度高,特异性强,是当前分子生物学研究的重要手段。技术原理 原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的核酸复性结合而使得...
原位杂交技术应用于染色体、细胞和组织切片等样品中进行核酸特异性检测,与免疫组化技术的结合应用,能将DNA、mRNA和蛋白水平上的基因活性与样品的显微拓扑信息结合起来。1969年Pardue和Gall将放射性标记的探针直接应用于纯化核酸的杂交,此后得益于分子克隆技术的发展,及不同探针标记系统和检测系统...
分子原位杂交:利用一段顺序的单链DNA或RNA作探针,与解链的染色体上的DNA单链进行原位杂交,确定DNA或RNA所在位置。引言 核酸原位杂交技术就是利用放射性或非放射性标记的已知核酸探针,通过放射自显影或非放射检测系统在组织、细胞及染色体上检测特异DNA或RNA序列的一种技术,是一种直接、简便的研究基因定位和表达的...
主要用来检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。荧光原位杂交:首先对寡核苷酸做特殊的修饰和标记,然后用原位杂交法与靶染色体或DNA上特定的序列结合,通过与荧光素分子相耦联的单克隆抗体来确定该DNA序列在染色体的位置。常用于已知基因或序列的染色体定位和未克隆基因或遗传标记及染色体畸变的研究。Back 发展简史 ...
原位杂交技术 原位杂交技术 insituhybridization 原位杂交技术 杂交组织化学技术原位杂交免疫细胞化学技术 原位杂交技术是将分子生物学与细胞化学技术结合起来,以标记的核酸分子为探针,在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术 原位杂交技术的应用 对特定生理或病理条件下从DNA到mRNA到蛋白质这样一个基因表达过程进行定性和定位...
原位杂交(InSituHybridization,ISH)技术始于20世纪60年代。1969年首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,将该基因进行定位。1970年利用同位素标记核酸探针进行了基因定位,从而产生了原位杂交技术。2012.11.22 基本原理 利用碱基互补配对原则,将有标记的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对...
原位杂交技术最早是在20世纪70年代发展起来的,主要用于研究DNA在细胞中的位置和分布情况。其基本原理是利用亲和性标记的探针与目标DNA序列特异性结合,通过显色或荧光等方法来检测标记物的位置。 原位杂交技术的具体步骤包括控制组织或细胞的形态、固定样本、渗透处理、杂交、洗脱、显色和观察等。其中最关键的步骤是杂交...