原位杂交：在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段，在适宜的条件下，能过氢键结合，形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点，应用带有标记的（有放射性同位素，如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质）DNA或RNA片段作为核酸探针，与组织切片或...
【解析】菌落(或噬菌斑)的原位杂交(in situ hybridizaton)技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或 RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核...
答案: 原位杂交是指用标记的核酸探针,经放射自显影或非放射自显影体系,在组织、细胞及染色体水平对核酸进行定位和定量相对研究的一种方式。根据探针的标记方法,分为同位素原位杂交技术和荧光原位杂交技术。 (1)同位素原位杂交技术 运用核酸分子碱基顺序配对的互补性,用同位素符号的外源核酸(探针)和染色体上经过变性后的...
它基于两个主要原理:互补配对和探针标记。通过互补配对,可以使DNA探针与目标DNA的特定序列发生结合。探针通常被标记为荧光染料或放射性同位素,以便检测和定位。 2. 原位杂交技术的工作原理可以分为以下几个步骤: 2.1 首先,需要产生特定序列的DNA探针。这可以通过PCR扩增、限制性内切酶消化和合成等方法来实现。探针的...
原位杂交是一种分子生物学技术,可以用来检测DNA或RNA序列在细胞或组织中的位置和表达情况。它的原理是利用一段带有特定标记的DNA或RNA探针与靶标序列结合形成稳定的双链结构,从而可以通过可视化或其他手段来观察探针与靶标的结合情况。 1.样品的制备:收集细胞或组织样品,并进行适当的处理,例如固定、裂解或切片等。 2...
荧光原位杂交(FISH)技术是一种分子遗传学实验技术,其基本原理是将直接与荧光素结合的寡聚核苷酸探针或采用间接法标记的寡聚核苷酸探针与变性后的染色体、细胞或组织中的核酸按照碱基互补配对原则进行杂交,经变性-退火-复性-洗涤后即可形成靶DNA 与核酸探针的杂交体,直接检测或通过免疫荧光系统检...
荧光原位杂交技术是一种重要的非放射性原位杂交技术，原理是利用报告分子（如生物素、地高辛等）标记核酸探针，然后将探针与染色体或DNA纤维切片上的靶DNA杂交，若两者同源互补，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。此时可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测体系在镜下对待DNA进行定性...
原位杂交技术是一种利用核酸分子互补配对原理的检测方法。其核心在于，通过将具有特定核苷酸序列的外源核酸（探针）与组织、细胞或染色体上的DNA或RNA进行配对，形成特定的杂交分子。这个过程要求三个关键条件：首先，待检测的样本需要通过固定保持其结构；其次，探针应能与样本中特定的核酸片段精确匹配；最后，...