RT—PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA,关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT及基因特异性引物中的一种...
qPCR是荧光染料,做定量,一般是看表达,就是基因的表达情况,基因层面 rtPCR是半定量,相对上面的定量来说没有完全量化,相当于是质化,也能看出问题 western 是做蛋白的
通常RT primer 可分为三类:oligo dT,随机引物以及基因特异性引物。 根据不同的实验需求需要选择适合的引物进行使用。 oligo dT 可以获得真核生物 mRNA 全长;而 mRNA 长度过长,或者没有 polyA 尾(原核 mRNA 或 rRNA),就需要考虑使用随机引物进行 RNA 的反转录,随机引物虽能确保长基因的 5" 末端的转录,但并不...
11:24:59 大肠杆菌用16S RNA,其他的菌应该也可以用吧 恩 我的是胶质芽孢杆菌 用的也是16s ...
大肠杆菌用16S RNA,其他的菌应该也可以用吧
根据MIQE(Minimum Information for Publication of Quantitative Real-Time PCR Experiments)的指导方针,qPCR为Quantitative real-time PCR的简称,RT-qPCR指的是Reverse transcription–qPCR,RT-PCR仅用来表示Reverse transcription polymerase chain reaction,而不是Real-time PCR,但是有少数作者并没有坚持这一原则。