https://www.youtube.com/watch?v=tL22O5yV9rA新手向,Western Blot Step-by-Step Protocol 详解,实验技术指南,熟肉, 视频播放量 1148、弹幕量 1、点赞数 47、投硬币枚数 8、收藏人数 155、转发人数 7, 视频作者 核能垃圾桶, 作者简介 工作太忙,更新随缘～,相关视频:【
可用BIO-RAD Trans-Blot Turbo 5x Transfer Buffer (1份 20ml) + ethanol (1份 20ml) + nanopure water (3份 60ml) (需预冷) 2A~2.5A,恒压25V,10min(可根据需要改变条件)BIO-RAD仪器。 2.4 封闭和敷一抗 将PVDF膜放入封闭液(1% milk in 1x TBST 含 0.1% Tween 20;或者3% BSA in 1x TBST 含...
WesternBlotprotocol实验步骤 WesternBlotprotocol实验步骤 Western Blot protocol 主要试剂及缓冲液的配制 1). 30%丙烯酰胺：将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为100ml的⽔中。搅拌器帮助溶解，滤纸过滤除杂质，避光保存于4度冰箱。2). 10% SDS：称量10g⼗⼆烷基硫酸钠，加⼊80ml超纯⽔...
Western blot素来就是个老生常谈的实验,饶是如此,新手们仍是深觉此坑易入不易出,但老司机却已经达到坐看云起时的淡然境界,原因无他,多番的千锤百炼早已练就了金刚不坏之身,深谙WB实验的他们对其流程中的任一细节都了如指掌。 现如今就将这素不外传的操作秘籍分享给大家,让大家可愉快与WB实验玩耍。
Western_Blot_protocol Western Blot Protocol (一)取材 当天提蛋白，来自cell culture中的传代cell line。1.取种有细胞的六孔板，真空吸去培养液，PBS洗3遍。2.加入裂解液，裂解液配方：1份PI（蛋白质抑制剂，10×原液加PBS稀释至 1×），1份TritonX-100（10×原液加PBS稀释至1×），8份PBS。3.用刮刀把...
WesternBlot原理、protocol洗膜时间可以稍微长一点一抗和二抗的比例需要参考说明书保存和回收条件也是一抗是什么动物来源的二抗就是抗一抗动物的抗体比如说一抗是来源于rabbit二抗就是antirabbit WesternBlot原理、protocol 一、组织、细胞总蛋白抽提:参考相关裂解液; 二、蛋白浓度测定:BCA法,这个结果要参考说明书!
三、Western blot步骤: (一)、玻板的清洗: 自来水→75%酒精擦拭→ddH2O→竖放晾干/吹干(做胶的一面朝内)【勿用手指触摸玻板内侧面】装板: 低的一面向内,确认玻板底部平齐,插入斜楔板压实卡紧,加ddH2O不漏,滤纸吸干水; (二)、配胶(1.0mm): 分离胶 5% 浓缩胶, 3 ml/块胶 ...
Western-Blot-Protocol实验操作步骤 一、提取抗原蛋白 将提取RNA途中留存的样品,加入150μl100%酒精充分混匀,静置 5min(RT),2000×g,4℃离心5min,吸取上清至新管中,加入750μl异丙醇,混匀,静置10min(RT),12000×g,4℃离心 10min,弃上清,加入1ml0.3mol/L盐酸胍/95%酒 2020-09-01 12:24 News WIKI ...
western blot protocol Western Blot 原理和操作方法(详细) 工作原理 蛋白质的电泳分离是重要的生物化学分离纯化技术之一 ,电泳是指带电粒子在电场作用下 ,向着与其电荷相反的电极移动的现象 .根据所采用的支持物不同 ,有琼脂糖凝胶电泳 ,淀粉凝胶电泳 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳等 .其中,聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) 由于...
This portion of the protocol is usually handled in cold temperatures to preserve the tissues. Nurse The gel electrophoresis process is the next step in western blot protocol. In this portion, the proteins are identified by various factors such as molecular weight or electrical charge. This ...