结果 通过酶 切鉴定和测序表明成功构建 了pBiFC—VN173一Olig2和 pBiFC—VC155一Id4真核表达质粒 ;该质粒能够有效地共 同转染到 靶细胞,Olig2和 Id4在靶细胞中能够高效表达,并可以相互结合出现BiFC荧光信号,且该信号主要分布于胞质中。结 论 成功构建了用于 BiFC技术 的真核表达载体 ,并在活细胞内检测到 ...
目的构建pBiFC-VN173-Olig2和pBiFC-VC155-Id4真核表达质 粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察Olig2与Id4的相互作用.方法利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),以新生大鼠脊 髓RNA为模板,扩增Olig2和Id4基因,分别定向克隆到pBiFC-VN173和pBiFC-VC155载体中,获得pBiFC-VN173- Olig2和pBiFC-VC15...
摘要: 目的 构建pBiFC-VN173-Olig2和pBiFC-VC155-Id4真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察Olig2与Id4的相互作用.方法 利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),以新生大鼠脊髓RNA为模板,扩增Olig2和Id4基因,分别定向克隆到pBiFC-VN173和pBi... 查看全部>> ...
I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VC155中,筛选含有目标基因的正确克隆.利用RT-PCR扩增人乳腺癌细胞株SKBR3的CXCR4全长基因后,T-A亚克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VN173载体中.然后,经酶切鉴定及DNA测序分析2个基因是否正确连接至真核表达载体中.应用脂质体转染的方法共转染pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VC155-CXCR4...