研究人员发现,过表达MAX或MYC能明显挽救USP1敲低诱导的RL-4RH细胞的增殖抑制。一致的是,在利妥昔单抗/化疗耐药的DLBCL小鼠模型中,通过MAX或MYC的过表达,明显恢复了USP1-缺失肿瘤的生长和重量下降。 图5.MAX或MYC的过量表达挽救了USP1敲低所引起的细胞增殖抑制 研究结论:在利妥昔单抗/化疗耐药的DLBCL细胞和小鼠...
研究人员发现,过表达MAX或MYC能明显挽救USP1敲低诱导的RL-4RH细胞的增殖抑制。一致的是,在利妥昔单抗/化疗耐药的DLBCL小鼠模型中,通过MAX或MYC的过表达,明显恢复了USP1-缺失肿瘤的生长和重量下降。 图5.MAX或MYC的过量表达挽救了USP1敲低所引起的细胞增殖抑制 研究结论:在利妥昔单抗/化疗耐药的DLBCL细胞和小鼠...
4.在利妥昔单抗/化疗耐药的DLBCL细胞和小鼠模型中,过量表达MAX或MYC可挽救USP1敲低诱导的细胞增殖抑制作用 为了研究USP1敲低诱导的细胞增殖抑制是否是由MAX或MYC蛋白在DLBCL细胞中的降解引起的,研究人员构建了针对MAX或MYC的shRNA并敲低了DLBCL细胞中的MAX或MYC。结果显示,敲低MAX或MYC明显抑制了细胞增殖,并诱导DLB...
除了在DDR途径中的作用外，最近的报告表明USP1在EMT和干细胞状态调节中的作用。作者观察到USP1的基因和药物失活降低了基础和CDDP诱导的与癌症干细胞表型相关的基因表达，包括KLF4、Sox2和c-Myc。此外，通常用于评估癌症干细胞特征的球状体形成试验显示，在未处理和CDDP处理的条件下，USP1沉默的细胞形成的球状体比对照...
用siControl或siUSP1转染HLF细胞24小时,然后用Myc或Myc-TAZ转染。免疫印迹数据显示,USP1敲低降低了TAZ的蛋白水平,这可以通过进一步过表达TAZ来逆转。qPCR数据表明,Hippo靶基因的表达因USP1的缺失而下调,并被进一步的TAZ过表达所回补。荧光素酶报告实验表明,HLF细胞中USP1的缺失抑制了TEAD反应元件的活性,这种表型被TAZ...
正如预期，免疫沉淀实验证实USP1与MYC-WDR48可相互作用。先前的研究证明雷帕霉素可诱导由TRAF6介导的ULK1的K63位泛素化。为了评估USP1是否与ULK1的K63位的去泛素化有关，作者分析了雷帕霉素治疗前后对照组和USP1敲低细胞中ULK1的泛素化状态。作者证实了雷帕霉素治疗后K63位泛素化会增加。有趣的是，USP1敲低大大...
使用重组蛋白GST-USP1或无催化活性的突变体GST-USP1 C90S进行的体外GST牵引实验表明,两种纯化蛋白都能与Myc-PARP1结合,而GST本身在无细胞条件下不能与Myc-PARP1结合(图1K),这表明它们的直接相互作用与USP1的酶活性无关。 为了研究USP1和PARP1之间相互作用的特定区域,作者生成了这两种蛋白的截短突变片段(图1L、...
为了研究这种影响是直接还是间接发生的,作者通过免疫共沉淀分析研究了ULK1-USP1的相互作用。USP1底物通常与USP1辅因子WDR48相互作用。因此,将编码MYC-WDR48的表达载体转染到完整的HEK293细胞中,并在免疫沉淀和免疫印迹后监测可与WDR48相互作用的蛋白。正如预期,免疫沉淀实验证实USP1与MYC-WDR48可相互作用。
用siControl或siUSP1转染HLF细胞24小时,然后用Myc或Myc-TAZ转染。免疫印迹数据显示,USP1敲低降低了TAZ的蛋白水平,这可以通过进一步过表达TAZ来逆转。qPCR数据表明,Hippo靶基因的表达因USP1的缺失而下调,并被进一步的TAZ过表达所回补。荧光素酶报告实验表明,HLF细胞中USP1的缺失抑制了TEAD反应元件的活性,这种表型被TAZ...
作者观察到USP1的基因和药物失活降低了基础和CDDP诱导的与癌症干细胞表型相关的基因表达,包括KLF4、Sox2和c-Myc。此外,通常用于评估癌症干细胞特征的球状体形成试验显示,在未处理和CDDP处理的条件下,USP1沉默的细胞形成的球状体比对照细胞少,支持USP1在获得干细胞样表型中的作用。