THP-1 细 胞 换 液 方 法 离心换液法:1. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等;(培养基提前预热)2. 将所有细胞悬液转移至离心管中;3. 900-1000rpm,3min离心;4. 弃上清,加5mL PBS轻轻重悬细胞进行润洗,再900-1000rpm,3min离心;Tips:此处PBS润洗是为了去除细胞碎片,平时培养若
THP-1细胞可通过化学物质处理、细胞因子刺激或共培养等方法,诱导其分化为具有巨噬细胞特性的细胞群。机理 细胞因子刺激是一种常见的THP-1细胞诱导分化方法。IL-4和IL-13等细胞因子能够促使THP-1细胞分化为巨噬细胞,并启动特定的信号通路,进而调控细胞功能。这种方法可以模拟体内的免疫调节过程,并提供一种便捷的方...
首先,了解一下THP-1的基本信息。图1 THP-1细胞生长正常图片 细胞复苏:1) 准备工作:将完全培养液置37℃水浴锅预热30分钟。2)在超净台内吸取7 mL完全培养液至15 mL离心管中 3)将细胞从干冰里取出,用镊子夹住盖子放入37℃水浴中快速晃动(注意:水不能没过盖子),使其在1分钟左右完全融化;4)将细胞悬液...
答:1.THP-1细胞培养过程中出现少量细胞贴壁属于正常情况,THP-1细胞被发现自发贴壁[3],可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞;2.当贴壁细胞比例高于20%,建议排查细胞生长培养箱温度及CO2浓度、培养基成分(营养体系的酸碱性)、以及培养瓶可用非TC处理过的培养瓶,不利于细胞贴壁;3.更换血清可能会导致THP-1细胞...
THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。 THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw...
单核细胞THP-1用PMA诱导后,由悬浮式生长变成贴壁生长,由圆形变成不规则形态,体积进一步增大,细胞浆疏松,细胞核增大明显,可见大量明显细胞器,胞膜周围可见少量突起[3]。 图2. THP-1经PMA诱导分化为巨噬细胞 THP-1分化为泡沫细胞 THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞后,可以通过摄取大量脂质转变为泡沫细胞,这也是动脉粥样...
一、THP-1细胞来源巨噬细胞极化及鉴定 1.1 用RPMI 1640完全培养基(1640培养基+10%FBS+双抗)重悬...
THP-1细胞系是1980年建立的人单核细胞白血病细胞系,从一位患有急性单核细胞白血病的小男孩外周血中分离得到,有分化多种巨噬细胞的能力,被广泛应用于单核细胞和巨噬细胞的相关机制、免疫和炎症信号通路等研究。NOTES 细胞培养注意事项 1、该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量,冻存时活细胞密度不能...
图4 部分贴壁的THP-1(人单核细胞白血病细胞) 二、THP-1聚团问题 如图5所示,THP-1细胞在密度较稀时,有少量细胞聚团属于正常现象,不建议将聚团的细胞吹散,等待密度高时,细胞会自然分散开。 当细胞密度高时,聚团细胞比例高于30%时,并且细胞团呈糜烂状,细胞之间界限不清,胞体质...
THP-1细胞是从急性单核细胞白血病患者外周血中分离出来的单核细胞,广泛应用于单核细胞和巨噬细胞相关机制、信号通路等研究;形态和分化特性类似于原代单核细胞和巨噬细胞,在体外,常用PMA(phorbol 12-肉豆酸酯13-乙酸酯)或1α,25(OH)2D3 (1α,25-二羟基维生素D3或vD3)诱导分化THP-1细胞为巨噬细胞。因此,THP...