首先,培养THP-1细胞,并使用诱导剂如Phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)进行极化。通常使用50 ng/mL或100 ng/mL的PMA处理24-48小时,以诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞。 处理后,移除PMA,并用新鲜培养基孵育24小时,让细胞恢复并达到M0状态。形态变化: 单核细胞THP-1在PMA诱导后,从悬浮式生长变为贴壁生长。细胞...
1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以使其稳定并成熟为M0巨噬细胞。2.细胞培养条件:在含10%胎牛血清、10 mM Hepes、1 mM丙酮酸盐和50 µM β-巯基乙醇的RPMI 1640培养基中...
这两个标记物可以帮助我们确认细胞是否成功诱导成了M0巨噬细胞。 后续实验 🧪 诱导完M0之后,我会进行不同药物的干预实验。不过要注意,后续使用的培养基里不能含有PMA哦。至于M1和M2的实验,我暂时还没经验,但可以参考一些文献,比如《Optimization of differentiation and transcriptomic profile of THP-1 cells into ...
可见,用200ng/mL PMA刺激 72小时后,悬浮的 THP-1 单核细胞分化为 M0 巨噬细胞,粘附在细胞壁上,并有伸展的突起。接着,再用20ng/mL IFN-γ和 100ng/mL LPS(诱导向M1分化) 或20ng/mL IL-4(诱导向M2分化) 处理 24小时后,巨噬细胞呈现较大的胞体和较长的突起,说明可能分别往M1或M2分化了。 (B)图...
佛波酯诱导THP-1分化为M0型巨噬细胞的条件优化
目的优化诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞所需的佛波酯(PMA)浓度和刺激时间.为研究生物活性材料对巨噬细胞表型和功能的调控作用奠定实验基础.方法分析不同PMA浓度与刺激时间下THP-1细胞的形态,贴壁程度,M0型巨噬细胞表面标志物以及巨噬细胞M1和M2表型相关基因的表达.结果在25~100 ng/mL PMA浓度范围和24~72 h刺...
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阴道毛滴虫主要感染女性的阴道,尿道和外阴部位,以及男性的尿道和前列腺中,引发滴虫病.其临床症状主要为引起机体阴道炎,尿道炎,盆腔炎,宫颈炎,前列腺炎及其他不良后果.目前对于Tv触发炎症过程的机制尚不明确.本研究旨在探讨阴道毛滴虫分泌的巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)对THP-1巨噬...
目的: 研究Ang II对人单核/巨噬细胞(THP-1细胞)凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)蛋白表达和基因转录的影响,从细胞蛋白,分子水平探讨Ang II和巨噬细胞LOX-1相互之间的关系,以进一步了解两者在动脉粥样硬化中的地位.方法: 将不同浓度AngII(1×10-9-1×10-5 mol/L)与经0.1 μmol/L佛波酯(PMA)诱导分...
(IL-10) was significantly up-regulated in the THP-1 cells that over-expressed vimentin (140.9 ± 17.2 pg/day/105 cells vs.undetectable in control cells).Contusions:In summary,the vimentin may regulate innate immunity through modulating monocytes viability as well as inflammatory response in ...