1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以使其稳定并成熟为M0巨噬细胞。2.细胞培养条件:在含10%胎牛血清、10 mM Hepes、1 mM丙酮酸盐和50 µM β-巯基乙醇的RPMI 1640培养基中...
可见,用200ng/mL PMA刺激 72小时后,悬浮的 THP-1 单核细胞分化为 M0 巨噬细胞,粘附在细胞壁上,并有伸展的突起。接着,再用20ng/mL IFN-γ和 100ng/mL LPS(诱导向M1分化) 或20ng/mL IL-4(诱导向M2分化) 处理 24小时后,巨噬细胞呈现较大的胞体和较长的突起,说明可能分别往M1或M2分化了。 (B)图...
单个核细胞在37°C、5%CO2条件下培养7d,每3d更换一次培养液,获得MDM。 MDM得到之后,去除培养基后: •若与新鲜的、无血清的RPMI继续培养,则维持M0状态。•若与LPS(1μg/ml)和IFN-γ(10 ng/ml)孵育48小时,则向M1极化。•若与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(5 ng/ml)孵育48小时,则向M2表型极化。 极化...
目的优化诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞所需的佛波酯(PMA)浓度和刺激时间.为研究生物活性材料对巨噬细胞表型和功能的调控作用奠定实验基础.方法分析不同PMA浓度与刺激时间下THP-1细胞的形态,贴壁程度,M0型巨噬细胞表面标志物以及巨噬细胞M1和M2表型相关基因的表达.结果在25~100 ng/mL PMA浓度范围和24~72 h刺...
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血细胞Thp1,Molm13,M0LT4,白血病是一种造血系统的恶性肿瘤,是国内十大高发恶性肿瘤之一,多发于儿童和青少年。其中急性白血病具有发病急、发展快、病死率高的特点。是各大院校和科研单位研究的重点,所以白血病细胞株基础实验中常用的细胞系。
目的: 研究Ang II对人单核/巨噬细胞(THP-1细胞)凝集素样氧化低密度脂蛋白受体(LOX-1)蛋白表达和基因转录的影响,从细胞蛋白,分子水平探讨Ang II和巨噬细胞LOX-1相互之间的关系,以进一步了解两者在动脉粥样硬化中的地位.方法: 将不同浓度AngII(1×10-9-1×10-5 mol/L)与经0.1 μmol/L佛波酯(PMA)诱导分...
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