师兄你好!我刚开始在做THP-1 NLRP3炎症小体模型,请问用PMA诱导成为巨噬细胞以后,是否LPS按照常规操作,1μg/ml 3h左右,或者100ng/ml过夜,然后加NLRP3刺激剂例如Nigericin或者ATP,即可分泌IL-1β了嘛?还是需要LPS处理2天,将THP-1极化成M1型,再用ATP等刺激?谢谢师兄!坐等! 2022-07-05· 北京 回复1 ...
首先通过在BMDM/Ppia-/-（图2A）、THP-1/PPIA-/-（图S3A）、A549/CypA-（图S3B）模型中的ELISA实验可知，当ATP刺激炎症小体激活时，CypA突变型细胞系中IL-1β的表达是显著低于对应WT细胞系的。（2）LPS诱导的炎症消退阶段中，CypA的抑制作用 有报道指出，在没有如ATP的二级信号的刺激下，IL-1β的加工和...
2.HTNV感染THP-1细胞后可诱导表达IL-1β 用MOI=1,MOI=2和MOI=10的HTNV76-118株分别感染THP-1细胞,同时设LPS,ATP刺激为阳性对照,灭活病毒为阴性对照组,2h后换液并继续培养细胞;24h后收集细胞上清,用ELISA检测其中的IL-1β.结果显示,不同MOI的HTNV均可诱导THP-1细胞产生IL-1β,使用的病毒量越大,细胞...
而后,利用佛波酯(PMA,100 ng/mL)处理THP-1细胞48h诱导其分化成巨噬细胞后,以脂多糖(LPS, 10μg/mL)联合腺苷三磷酸(ATP, 5 mmol/L)处理细胞建立炎症模型.以不同浓度萝卜硫素(1, 5, 10, 20μmol/L)处理模型细胞后观察对NLRP3炎症小体激活的影响.免疫荧光染色法检测模型细胞中NF-κB的主要亚基p65的核...
(2)LPS诱导的炎症消退阶段中,CypA的抑制作用 有报道指出,在没有如ATP的二级信号的刺激下,IL-1β的加工和释放是低效的,且大多数合成的产物都被留在细胞内,要么不被处理,要么被降解。为了探究CypA为什么能在炎症晚期阶段抑制IL-1β的表达,作者随后研究了CypA对pro-IL-1β稳定性的影响。首先还是利用免疫印迹法,直...
(2)LPS诱导的炎症消退阶段中,CypA的抑制作用 有报道指出,在没有如ATP的二级信号的刺激下,IL-1β的加工和释放是低效的,且大多数合成的产物都被留在细胞内,要么不被处理,要么被降解。为了探究CypA为什么能在炎症晚期阶段抑制IL-1β的表达,作者随后研究了CypA对pro-IL-1β稳定性的影响。首先还是利用免疫印迹法,直...
然而,由Pannexin-1蛋白寡聚体组成的膜通道,能否调控脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞释放ATP尚未见报道。因此,本课题目的在于研究Pannexin-1通道能否作为LPS诱导巨噬细胞释放ATP的途径,并且初步探讨Pannexin-1通道对巨噬细胞摄取氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)的调节作用,为预防...
目的 观察HCMV感染THP-1源性巨噬细胞后,促炎细胞因子IL-1β表达的时序性变化.方法 构建HCMV感染THP-1源性巨噬细胞模型,设立HCMV AD169标准毒株感染组,模拟感染对照组,LPS+ATP对照组和poly(dA:dT)对照组.用ELISA法测定THP-1源性巨噬细胞培养上清IL-1β水平在病毒感染细胞后lh,3h,6h,12h,24 h和48...
(2)LPS诱导的炎症消退阶段中,CypA的抑制作用 有报道指出,在没有如ATP的二级信号的刺激下,IL-1β的加工和释放是低效的,且大多数合成的产物都被留在细胞内,要么不被处理,要么被降解。为了探究CypA为什么能在炎症晚期阶段抑制IL-1β的表达,作者随后研究了CypA对pro-IL-1β稳定性的影响。首先还是利用免疫印迹法,直...
摘要: 目的 观察HCMV感染THP-1源性巨噬细胞后,促炎细胞因子IL-1β表达的时序性变化.方法 构建HCMV感染THP-1源性巨噬细胞模型,设立HCMV AD169标准毒株感染组、模拟感染对照组、LPS+ATP对照组和poly(dA:dT)对照组.用ELISA法测定THP-1源性巨噬细胞培养上清IL-1β水平在病毒感染细... 查看全部>> ...