目的:探讨高糖状态下金葡菌对THP-1人单核细胞表达iNOS和IL-1β的影响.方法:体外培养THP-1细胞,采用2×2析因分析实验设计,以高糖,细菌2个因素,每个因素2个水平交叉分为对照组,高糖组,细菌组和高糖细菌组.各组提取细胞总RNA,应用半定量逆转录聚合酶链反应(SQ-RT-PCR)法,检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白...
【黄芩苷和京尼平苷联用对THP-1来源巨噬细胞极化和炎症的影响】目的:观察黄芩苷和京尼平苷联用对脂多糖(LPS)诱导人髓系白血病单核细胞(THP-1)来源巨噬细胞极化方向以及炎症反应的影响。方法:采用LPS诱导THP-1来源巨噬细胞极化与炎症,通过免疫荧光法检测M1型特征分子一氧化氮合酶(iNOS)的表达,ELISA法检测细胞上清...
ELISA、流式细胞术等方法进行鉴定。(M1标记物如:CD80, iNOS, IL-1β, IL-6, CXCL1等;M2标记物...
金葡菌对高糖状态下THP-1人单核细胞表达iNOS和IL-1β的影响
动态观察高糖对THP-1人单核细胞表达iNOS和IL-1β的影响
目的:了解问号钩端螺旋体(简称钩体)对小鼠和人单核-巨噬细胞株诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及 一氧化氮(NO)水平的影响,了解不同宿主巨噬细胞对问号钩体的杀菌机制.方法采用问号钩体56601株感染J774A.1及人单核细胞株THP-1建立 钩体细胞感染模型,采用re-al-time RT-PCR法和流式细胞术分别测定细胞iNOS mRNA...
(M1标记物如:CD80, iNOS, IL-1β, IL-6, CXCL1等;M2标记物如 CD206, CD163, IL-10, CCL...
结论:1.PMA刺激THP-1分化为巨噬细胞的过程中同时加用LPS+IFN-γ能使其向M1型巨噬细胞分化;加用IL-4则使其向M2型巨噬细胞分 化;2.PMA刺激THP-1分化为巨噬细胞的过程中上调CD137L的表达,1F1虽升高iNOSmRNA,但对iNOS蛋白表达率以及IL-6, TNF-α,IL-10的分泌无影响,在此条件下可能并不影响THP-1来源巨...
-可以通过免疫荧光染色、Western blot、RT-PCR等手段来检测M1巨噬细胞的特征标记物,如iNOS(一氧化氮合酶)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)等。 -对于免疫荧光染色实验,先用PBS洗涤细胞,然后用4% paraformaldehyde固定细胞,再用0.1% Triton X-100进行渗透处理。随后,使用适当的抗体与细胞进行孵育,进行特定标记物的检测。
-使用适当的标记方法(例如,荧光染料或抗体标记)标记M1相关标记物(例如,IL-12,iNOS等)。 -进行显微镜观察,并通过相应的检测器检测标记物的表达。 5.数据分析和统计 -收集并记录细胞标记物表达的定量数据。 -使用适当的统计学方法(例如,t检验,方差分析等)分析数据。 -根据实验结果绘制图表或图形,并进行解释和讨论...