1. 直接分瓶法：摇晃培养瓶，把细胞摇匀，均分到两个瓶子里，每瓶再补充等量培养基；2. 离心法：离心后计数，按照40-50万细胞/mL的密度接种到T25瓶里，瓶中培养基量以5mL为宜。不方便计数时，按1:2比例传代。小贴士：细胞碎片较多的情况下，建议用离心法传代，离心转速可适当降低（推荐800~1000rpm或160~20...
气相条件：THP-1细胞需要在含有95%空气和5%二氧化碳（CO2）的混合气体环境中培养，以模拟细胞在体内的生长环境。温度与湿度：培养箱的温度应维持在37摄氏度，湿度通常保持在70%-80%，以确保细胞在最佳条件下生长。三、细胞传代与换液 传代方法：当THP-1细胞的密度达到80万/mL以上时，通常需要进行传代。传代时，可...
1. 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。 2. 没有程序降温盒的同学,可以选择非程序冻存液(使用前咨询试剂商是否适用于THP-1),或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。 培养攻略之复苏篇 复苏步骤:...
1. 取少量细胞悬液进行计数确认细胞密度。Tips：若冻存前培养基已经变黄，先换液静置培养4h左右，待细胞活力稳定后再进行冻存。2. 准备所需的培养基、PBS、血清、DMSO、离心管以及无菌枪头等；（试剂需提前预热）3. 根据收集到细胞量，配制相应量的冻存液，并准备相应数量的冻存管，在冻存管上标志细胞...
1.收集THP-1细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,加 1 mL新鲜培养基重悬细胞,进行细胞计数。 2.根据THP-1细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×10^6-1×10^7/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 3.将冻存管放入-80℃冰箱,24 h...
4. 传代方式:THP-1有密度依赖性,且在偏酸性的环境中生长良好,常通过半换液的方式进行换液以及传代。 注意: (1)博主的经验是一个T25 flask静置后铺展为一层均匀细胞至90%(约900万细胞),可吹匀后直接进行1:2传代,1-2天即可再次传代。博主一般1:2传代后补完全培养基至4-5mL,24小时后若细胞状态良好,且暂...
1. 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。 2. 没有程序降温盒的同学,可以选择非程序冻存液(使用前咨询试剂商是否适用于THP-1,并做冻存测试),或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。
THP-1细胞系是1980年建立的人单核细胞白血病细胞系，从一位患有急性单核细胞白血病的小男孩外周血中分离得到，有分化多种巨噬细胞的能力，被广泛应用于单核细胞和巨噬细胞的相关机制、免疫和炎症信号通路等研究。NOTES 细胞培养注意事项 1、该细胞冻存后复苏率较低，冻存时请酌情提高细胞量，冻存时活细胞密度不能...
1. 取少量细胞悬液进行计数确认细胞密度。 Tips:若冻存前培养基已经变黄,先换液静置培养4h左右,待细胞活力稳定后再进行冻存。 2. 准备所需的培养基、PBS、血清、DMSO、离心管以及无菌枪头等;(试剂需提前预热) 3. 根据收集到细胞量,配制相应量的冻存液,并准备相应数量的冻存管,在冻存管上标志细胞名称,代...
1) 因为thp-1是悬浮细胞，易受到冻存的影响，所以需要在冻存时加大细胞密度以提高复苏细胞的存活率，建议冻存时细胞密度至少在2×106~5×106个细胞/mL。2) 复苏时，若对冻存细胞数量不确定，可将细胞复苏至6孔板的单孔中，待细胞状态恢复后再转移至更大体积的培养瓶中继续培养。基因编辑小tips 小源拥有N多例...