2. 离心法：离心后计数，按照40-50万细胞/mL的密度接种到T25瓶里，瓶中培养基量以5mL为宜。不方便计数时，按1:2比例传代。小贴士：细胞碎片较多的情况下，建议用离心法传代，离心转速可适当降低（推荐800~1000rpm或160~200g）。THP-1细胞传代时机 培养攻略之冻存篇 冻存步骤：Step1：预先配制好冻存液 Ste...
THP-1 细 胞 传 代 方 法 离心法：1. 取少量细胞悬液进行计数确定细胞密度，密度80万/mL以上传代，并根据计数结果确定传代比例；2. 准备所需的培养基、离心管以及无菌枪头等；（培养基提前预热）3. 用移液器吸取培养瓶内细胞悬液转移至离心管中；4. 900-1000rpm，3min离心收集细胞；5. 在培养瓶...
将THP-1细胞接种在6孔细胞培养板中,接种密度为1×105个细胞/ml,用浓度为10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml、80ng/ml和160ng/ml的PMA诱导。然后在添加PMA 12h、24h和36h后收集细胞,并用流式细胞仪检测分析。CD14的阳性率如表1所示。结果显示,80ng/ml组CD14的阳性率高于其他浓度组。同时,诱导时间为24h组CD14的...
3）根据计数结果确定传代比例，将细胞密度调整为2×105~4×105个细胞/mL，视细胞培养体积将细胞培养在不同规格的培养瓶中。4）置于37℃、5%CO2培养箱内培养。直接分瓶法：1）用电动移液枪轻柔混匀培养瓶里的细胞 2）吸取20ul细胞悬液进行细胞计数 3）根据计数结果将细胞密度调整为2×105~4×105个细胞/mL，...
THP-1细胞的培养方法和注意事项: 一、培养方法: 1.培养基:使用含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养基,确保无菌且不含抗生素。 2.细胞接种:以每孔1×10^5个细胞接种到96孔板,在37℃、5%二氧化碳的细胞培养箱中培养。 3.培养时间:通常情况下,每2-3天更换一次培养基,根据细胞生长情况决定传代时间。 4.细胞...
传代方法：当THP-1细胞的密度达到80万/mL以上时，通常需要进行传代。传代时，可以通过离心收集细胞，然后用新鲜培养基重悬后接种到新的培养瓶中。传代比例通常为1:2到1:4，具体比例可根据实验需求进行调整。换液频率：建议每2-3天进行一次换液或半换液操作，以保持培养基的新鲜度和适宜的营养浓度。换液时，应...
1. THP-1细胞冻存过后复苏困难: a. 冻存前细胞状态较好, 冻存总量不低于1*106/支 b. 复苏后细胞接种密度建议3*106/ml C. 如有细胞碎片,待细胞密度增大后通过低速离心去除 THP-1细胞传代后出现细胞贴壁现象: A. 如轻微贴壁,可以轻吹收集细胞或者丢弃贴壁部分细胞 B. 如贴壁较多,需检查培养条件是否合适 ...
THP-1细胞为悬浮细胞，少量贴壁不用担忧，但若贴壁比例高于20%，则为生长异常。细胞密度依赖性生长，建议接种密度为2-4 x 105个细胞/mL，当密度达到8x105个细胞/mL时传代，不建议超过1 x 106个细胞/mL，细胞密度维持在1.0x105 - 1.5x106 细胞/mL。细胞聚团成葡萄状，尤其在密度较低时，无需...
取对数生长期 THP - 1 细胞,计数后按 1×10⁶个 /mL 密度接种至培养器皿,像 6 孔板、24 孔板等依实验规模选定。加入 PMA 使其终浓度达 20 - 100 ng/mL(常选 50 ng/mL),轻柔摇匀确保均匀分布。随即放回培养箱,24 - 48 小时是关键观察期。期间,细胞形态渐变,由悬浮的圆形单核细胞向贴壁伸展、胞体...