4. 传代方式:THP-1有密度依赖性,且在偏酸性的环境中生长良好,常通过半换液的方式进行换液以及传代。 注意: (1)博主的经验是一个T25 flask静置后铺展为一层均匀细胞至90%(约900万细胞),可吹匀后直接进行1:2传代,1-2天即可再次传代。博主一般1:2传代后补完全培养基至4-5mL,24小时后若细胞状态良好,且暂...
成功转染THP-1 (人单核白血病细胞) 悬浮细胞；出色的细胞转染结果与您分享;24小时荧光图片:
一般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3～4天再观察,一般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,一般2-3次换液离心一次(只是补充培养基)3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠2...
直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml...
（1）THP-1细胞在酸性环境中生长速度较快，当培养基呈橘红色时，适宜细胞生长。培养基中需添加β巯基乙醇。（2）THP-1细胞对血清品质要求较高，推荐使用优质胎牛血清。（3）THP-1细胞具有密度依赖性，培养密度较低时细胞生长缓慢。（4）THP-1细胞传代采取半换液法，摇匀细胞后，均分到两个瓶子里，每瓶再补加...
2.2 受试物浓度的选择 取对数生长期的 THP-1 细胞接种于 24 孔板,调 整铺板密度为 1×106·mL−1 ,每孔 990 μL.需要 2 块 24 孔板,即 UVA 照射板及做避光处理的未照射对照 板,每块 24 孔板中应设不加任何受试物的单纯细胞 孔作为对照组.将不同浓度的受试物与 THP-1 细 胞共同孵育 24 h ...
细胞培养时分布不均匀,通常操作步骤:做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度...
30nM,50nM,100nM四个梯度，每个梯度最好做2个复孔,转染前一天铺板，做转染前细胞密度在35%（细胞...
THP-1细胞镜下观察时,难以聚焦或估算密度怎么办:THP-1细胞形态特征悬浮生长,悬浮细胞会随着液体流动,不容易聚焦,静置5-10分钟使细胞沉底,之后再轻轻放上显微镜观察,将有助于聚焦和估算细胞密度
当THP-1 细胞融合度达到 80-90%时,收集细胞并计数; 使用37℃预热的成巨噬细胞诱导分化培养基重悬细胞,按照 5×105~1×106 cells/孔密度进行铺板,每孔加入 1mL 成巨噬细胞诱导分化培养基。 将细胞置于 37℃,5% CO2的培养箱中进行培养 48h。 48h 换液,换成 37℃预热的成破骨诱导分化培养基,每孔 1mL...