THP-1 细 胞 冻 存 方 法 1. 取少量细胞悬液进行计数确认细胞密度。Tips:若冻存前培养基已经变黄,先换液静置培养4h左右,待细胞活力稳定后再进行冻存。2. 准备所需的培养基、PBS、血清、DMSO、离心管以及无菌枪头等;(试剂需提前预热)3. 根据收集到细胞量,配制相应量的冻存液,并准备相应数量的...
1、该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量,冻存时活细胞密度不能低于4×106mL,细胞复苏后需要培养5-10天后状态才能恢复,前一周不要进行离心操作。2、该细胞对细胞密度较为敏感,培养、传代时请注意控制细胞密度。3、频繁的细胞计数是监测THP-1细胞状态的最佳方法。4、当细胞密度达到8×105个活细胞/...
1) THP-1细胞对血清质量有一定要求,可更换更好的血清品牌或者提高血清浓度(不超过20%,血清含量过高也会对细胞有毒性)2) 控制好细胞密度,不要太稀或者过密 3.冻存复苏活率低(存活率低):1) 因为thp-1是悬浮细胞,易受到冻存的影响,所以需要在冻存时加大细胞密度以提高复苏细胞的存活率,建议冻存时...
1. 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。2. 没有程序降温盒的同学,可以选择非程序冻存液(使用前咨询试剂商是否适用于THP-1),或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。培养攻略之复苏篇 复苏步...
答:1.THP-1细胞对冻存条件比较敏感,复苏存活率受冻存体系、冻存和复苏流程影响比较大;2.THP-1细胞冻存的密度过低,由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。4. 培养基里一定要加β-巯基乙醇( β-mercaptoethanol)吗?答:β-巯基乙醇是一...
最后我们要讨论的是关于THP-1复苏不起来怎么办?(如图6所示)该细胞对冻存密度有依赖,冻存密度建议5*106-107/ml;同时复苏密度也有依赖性,建议不低于3*106/ml。当细胞传过几次代,状态较好时,传代密度维持在5*105/ml-106/ml为宜,超过2*106/ml则需要传代。如有细胞碎片,待细胞密度增大后通过低速离心去除。
Fig1 参考自ATCC网站(https://www.atcc.org/products/tib-202) 2. 冻存与复苏:可使用商品化无血清冻存液,密度控制在2-3*106/ml为宜。复苏时,1000rpm(不同离心机对应的离心力不同,约200-300G即可) 3min,根据细胞数量使用T25 flask或6孔板。
细胞简称:THP-1细胞货号:SNL-044细胞种属:人生长情况:悬浮培养条件:H-DMEM+10%FBS+1%双抗培养环境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%二、细胞培养操作换液周期:2-3天培养基体积:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml传代比例:1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)传代方法: 尽量吸干净T25瓶原培养基...
人单核细胞白血病细胞(THP-1)冻存方法 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约 200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。 THP-1细胞对冻存温度比较敏感,建议冻存后立即转入-80℃冰箱,长 期保存应放在液氮罐中。 经测试,THP-1使用非程序降温冻存液的复苏存活率高于程序降温冻存液,推荐...