1、该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量,冻存时活细胞密度不能低于4×106mL,细胞复苏后需要培养5-10天后状态才能恢复,前一周不要进行离心操作。2、该细胞对细胞密度较为敏感,培养、传代时请注意控制细胞密度。3、频繁的细胞计数是监测THP-1细胞状态的最佳方法。4、当细胞密度达到8×105个活细胞/...
THP-1 细 胞 冻 存 方 法 1. 取少量细胞悬液进行计数确认细胞密度。Tips:若冻存前培养基已经变黄,先换液静置培养4h左右,待细胞活力稳定后再进行冻存。2. 准备所需的培养基、PBS、血清、DMSO、离心管以及无菌枪头等;(试剂需提前预热)3. 根据收集到细胞量,配制相应量的冻存液,并准备相应数量的...
1. 由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。2. 没有程序降温盒的同学,可以选择非程序冻存液(使用前咨询试剂商是否适用于THP-1),或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。培养攻略之复苏篇 复苏步...
或者离心后计数,按照40~50万细胞/mL的密度接种到新的培养瓶中。 传代比例通常为1:21:4,传代频次为23天传代一次。 冻存 预先配制好冻存液(通常含有DMSO和FBS)。 将细胞离心后去上清,用冻存液重悬细胞。 将细胞悬液转移至冻存管中,放入程序冻存盒,然后放入-80℃冰箱过夜,再放液氮长期保存。 冻存密度建议为...
1) THP-1细胞对血清质量有一定要求,可更换更好的血清品牌或者提高血清浓度(不超过20%,血清含量过高也会对细胞有毒性)2) 控制好细胞密度,不要太稀或者过密 3.冻存复苏活率低(存活率低):1) 因为thp-1是悬浮细胞,易受到冻存的影响,所以需要在冻存时加大细胞密度以提高复苏细胞的存活率,建议冻存时...
答:1.THP-1细胞对冻存条件比较敏感,复苏存活率受冻存体系、冻存和复苏流程影响比较大;2.THP-1细胞冻存的密度过低,由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。4. 培养基里一定要加β-巯基乙醇( β-mercaptoethanol)吗?答:β-巯基乙醇是一...
Fig1 参考自ATCC网站(https://www.atcc.org/products/tib-202) 2. 冻存与复苏:可使用商品化无血清冻存液,密度控制在2-3*106/ml为宜。复苏时,1000rpm(不同离心机对应的离心力不同,约200-300G即可) 3min,根据细胞数量使用T25 flask或6孔板。
冻存条件:THP-1细胞的冻存液配方通常为90%FBS+10%DMSO。冻存前,应确保细胞生长状态良好,并将细胞密度调整至200-300万细胞/mL/管。然后,将细胞悬液分装至冻存管中,并放入程序降温冻存盒中,再转移至-80℃冰箱进行降温冻存。次日复苏一管检查冻存效果,确认无问题后及时将冻存细胞放置液氮中保存。复苏步骤...
● 冻存时需提高密度,建议3-5×106细胞量冻存一管,冻存前一天换液; ● 避免频繁离心换液。 利用赛业智能的基因编辑系统进行基因编辑THP-1细胞系 基因修饰项目 THP-1细胞系的基因修饰包括基因敲除、点突变、基因敲入、过表达和干扰等,赛业生物通过优化THP-1的转染条件,实现THP-1基因编辑单克隆交付,可显著提高实...