THP-1 细 胞 冻 存 方 法 1. 取少量细胞悬液进行计数确认细胞密度。Tips：若冻存前培养基已经变黄，先换液静置培养4h左右，待细胞活力稳定后再进行冻存。2. 准备所需的培养基、PBS、血清、DMSO、离心管以及无菌枪头等；（试剂需提前预热）3. 根据收集到细胞量，配制相应量的冻存液，并准备相应数量的...
2）1100 rpm离心4 min，弃上清，加入适量4℃预冷的冻存液重悬细胞，吸取20 ul细胞悬液进行细胞计数，并调整细胞密度至少为2×106~5×106个细胞/mL 3）按1 mL/管分装至冻存管中，将冻存管放置于冻存盒中然后转移至-80℃冰箱 4）过夜后，将冻存细胞转移至液氮罐内保存。注意事项：1.THP-1细胞对冻存温度...
1、该细胞冻存后复苏率较低，冻存时请酌情提高细胞量，冻存时活细胞密度不能低于4×106mL，细胞复苏后需要培养5-10天后状态才能恢复，前一周不要进行离心操作。2、该细胞对细胞密度较为敏感，培养、传代时请注意控制细胞密度。3、频繁的细胞计数是监测THP-1细胞状态的最佳方法。4、当细胞密度达到8×105个活细胞/...
1. 由于THP-1是悬浮细胞，更易受到冻存影响，建议加大冻存密度，大约200万-300万/mL为宜，以提高复苏存活率。2. 没有程序降温盒的同学，可以选择非程序冻存液（使用前咨询试剂商是否适用于THP-1），或者按照【4℃ 20min→-20℃ 30min→-80℃ 过夜→液氮保存】的顺序手动梯度降温。培养攻略之复苏篇 复苏步...
答：1.THP-1细胞对冻存条件比较敏感，复苏存活率受冻存体系、冻存和复苏流程影响比较大；2.THP-1细胞冻存的密度过低，由于THP-1是悬浮细胞，更易受到冻存影响，建议加大冻存密度，大约200万-300万/mL为宜，以提高复苏存活率。4. 培养基里一定要加β-巯基乙醇（ β-mercaptoethanol）吗？答：β-巯基乙醇是一...
将细胞悬液转移至冻存管中,放入程序冻存盒,然后放入-80℃冰箱过夜,再放液氮长期保存。 冻存密度建议为200万~300万/mL,以提高复苏存活率。 4.注意事项 THP-1细胞对血清要求高,建议选用高质量的胎牛血清。 细胞密度低时生长较慢,可通过补液、换液或传代来维持适宜的细胞密度。
图5 严重聚团的THP-1(人单核细胞白血病细胞) 最后我们要讨论的是关于THP-1复苏不起来怎么办?(如图6所示)该细胞对冻存密度有依赖,冻存密度建议5*106-107/ml;同时复苏密度也有依赖性,建议不低于3*106/ml。当细胞传过几次代,状态较好时,传代密度维持在5*105/ml-106/ml为宜,超过2*106/ml则需要传代。如...
小贴士:由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。 | 培养条件 培养基:RPMI-1640+10%FBS+0.05 mM β-mercaptoethanol+1%P/S 推荐传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次 培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃ ...
冻存条件：THP-1细胞的冻存液配方通常为90%FBS+10%DMSO。冻存前，应确保细胞生长状态良好，并将细胞密度调整至200-300万细胞/mL/管。然后，将细胞悬液分装至冻存管中，并放入程序降温冻存盒中，再转移至-80℃冰箱进行降温冻存。次日复苏一管检查冻存效果，确认无问题后及时将冻存细胞放置液氮中保存。复苏步骤...