本研究通过在THP-1细胞中过表达WTAP,探讨了m6A蛋白在APS调节THP-1巨噬细胞炎症中的作用机制[1]。 为了研究黄芪多糖调节m6A修饰水平的机制,作者首先检测了黄芪多糖处理是否会影响脂多糖(Lps)诱导的THP-1巨噬细胞中m6A修饰系统相关蛋白的表达。如图1所示,APS处理24 h后,WTAP的mRNA表达明显降低,与其他相关蛋白相比,WT...
THP1的慢病毒感染 4.提前4-5天复苏THP1,不要临时抱佛脚提前1天复苏,这样的状态不太行。细胞状态好的THP1是感染成功的关键。THP1复苏后把它丢在一边不要管他,笔者一般加6ml 1640全培。这里有个细节,水浴锅解冻后直接加入1640培基中,不要再去离心去除冻存液然后重悬这个操作了,THP1 不喜欢反复离心。 等到第4...
实验结果显示,通过过表达WTAP,APS能够调节THP-1巨噬细胞中m6A修饰水平,揭示了APS在表观遗传水平调控炎症的新机制。此外,苯二氮卓类药物,如咪达唑仑,也被发现具有免疫调节特性,但其具体的细胞靶点和中间信号通路尚不明确。通过研究发现,咪达唑仑可通过激活TSPO(转录启动子复合体)信号传导,抑制L...
人源THP-1细胞过表达hLRRC77P基因 在人单核巨噬细胞(THP-1)中表达Human LRRC77P基因,采用广谱性EFS启动子,构建Human LRRC77P慢病毒载体,经病毒包装后转染细胞。 ● 实验组:LV-EFS>hLRRC77P>CMV>EGFP/T2A/Puro ● 对照组:LV-CMV>EGFP/T2A/Puro 过表达病毒转导THP-1细胞,药筛后获得过表达稳转株,各组...
SP110在THP1巨噬细胞中过表达模型建立及功能学研究.pdf,摘要 目的:构建SP110 基因过表达的人单核巨噬细胞THP-1细胞模型,体外感染结核分枝杆菌 H37Ra。初步探讨SP110基因在巨噬细胞抗Mtb 感染中的作用机制。 方法:①利用PCR法获取SP110基因序列,构建慢病毒载体LV5-SP110,
THP-1细胞系是一种人单核细胞白血病细胞系,具有类似人原代单核细胞的形态和功能特征,且易于在实验室中培养和扩增,是研究免疫和炎症机制的理想模型。因此,构建FNDC5过表达的THP-1细胞系,对于深入探讨FNDC5在炎症和免疫调节中的功能具有重要意义。材料与方法 1. 材料 · THP-1细胞系:购自某生物公司,用于构建...
过表达LPXN的THP—l细胞增殖、对Fn的粘附、ERK,Integrin“,o【5和Bl表达均高于对照组。过表达LPXN的THP—l细胞跨transwell的侵袭能力和MMP2活性均强于对照组。结论:LPXN基因可能通过上调ERK的表达促进THP—l细胞增殖;通过上调Integrin ct4、a5、131的表达促进THP—l细胞的粘附;通过激活MMP2促进THP一1细胞侵袭。
用高表达IL-34的骨髓间充质干细胞培养上清液来培养THP-1细胞,Real-time PCR分析THP-1细胞中IL-10和TNFα的表达变化.经双酶切和测序鉴定,成功构建了pIRES2-EGFP-IL-34重组体;转染至骨髓间充质干细胞的IL-34可以促进THP-1细胞表达IL-10和TNFα.结果表明,骨髓间充质干细胞表达分泌的IL-34对THP-1有调节作...
分化为THP-1源性巨噬细胞.Western blot结果显示,M1型巨噬细胞的标志性蛋白一氧化氮合酶(iNOS)表达量升高,M2型巨噬细胞的标志型蛋白精氨酸酶-1(Arg-1)表达量降低(P均<0.05).RT-PCR的结果显示,ROP16过表达组iNOS,白细胞介素-1(IL-1),白细胞介素-12(IL-12),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达均高于空...