结果显示,在转染WTAP过表达质粒的THP-1巨噬细胞中,APS介导的p65向细胞核转运的抑制被逆转。这些结果表明,APS通过WTAP介导的p65核易位调节IL-6的表达。 图3 APS通过WTAP介导的p65核易位调控IL-6的表达 综上所述,作者通过在THP-1细胞中过表达WTAP,研究了WTAP通过调节THP-1巨噬细胞中m6A修饰水平介导APS的抗炎作用,...
结果显示,在转染WTAP过表达质粒的THP-1巨噬细胞中,APS介导的p65向细胞核转运的抑制被逆转。这些结果表明,APS通过WTAP介导的p65核易位调节IL-6的表达。 图3 APS通过WTAP介导的p65核易位调控IL-6的表达 综上所述,作者通过在THP-1细胞中过表达WTAP,研究了WTAP通过调节THP-1巨噬细胞中m6A修饰水平介导APS的抗炎作用,...
结果显示,在转染WTAP过表达质粒的THP-1巨噬细胞中,APS介导的p65向细胞核转运的抑制被逆转。这些结果表明,APS通过WTAP介导的p65核易位调节IL-6的表达。 图3 APS通过WTAP介导的p65核易位调控IL-6的表达 综上所述,作者通过在THP-1细胞中过表达WTAP,研究了WTAP通过调节THP-1巨噬细胞中m6A修饰水平介导APS的抗炎作用,...
结果显示,在转染WTAP过表达质粒的THP-1巨噬细胞中,APS介导的p65向细胞核转运的抑制被逆转。这些结果表明,APS通过WTAP介导的p65核易位调节IL-6的表达。 图3 APS通过WTAP介导的p65核易位调控IL-6的表达 综上所述,作者通过在THP-1细胞中过表达WTAP,研究了WTAP通过调节THP-1巨噬细胞中m6A修饰水平介导APS的抗炎作用,...
THP1属于非常难转染的细胞系之一。鉴于瞬转很困难,笔者使用了自己组装的慢病毒感染,构建过表达的稳转细胞株,现将经验分享。 一、293T细胞的复苏及处理 1.复苏293T细胞,这个过程需要注意的是,293T必须没有支原体污染且生长良好。 第一天复苏,以一个10cm大皿为例,要充分混匀293T,使用DMEM高糖培基,然后静置,第二...
浓缩的慢病毒转染THP-1 2 d后,使用倒置荧光显微镜可明显观察到绿色荧光(图2),经嘌呤霉素筛选后,细胞无明显形态学变化,生长状态良好且未受支原体污染。过表达质粒中的PSMB9-eGFP-His融合蛋白大小为55kDa。WB结果显示,pHAGE-PSMB9-eGF...
中图分类号:R318 目的:采用不同质粒转染方法介导质粒绿色荧光蛋 白真核表达质粒(pEGFP—N1)转染人THP-1单核细胞,以 文献标识码:B 获得较高转染效率的方法 。 文章编号:2095-4344 方法:分别采用DEAE一葡聚糖、Lipofectamine2000、FuGENE6、梭华一Sofast转染试剂不同方法介导质 (2014)38-06105-05 粒绿色荧光蛋白...
1.2 细胞传代:THP-1细胞密度应在8×10^5至1×10^6个细胞/ml之间,每2-3天传代一次。 二、电转试剂 2.1 质粒DNA:选择合适的质粒表达载体,含有目的基因的表达序列。 2.2 转染试剂:常用的转染试剂有聚乙烯亚胺(PEI)和脂质体转染试剂。 2.3 负载DNA:将质粒DNA与转染试剂混合,形成复合物。 三、电转过程 3.1 TH...
THP-1-RFP-Puro稳转细胞株 产品货号 VGC-0012-002P 中文名称 RFP标记的THP-1稳转细胞株 细胞规格 复苏细胞(T25细胞瓶)或1×106细胞冻存细胞 细胞形态 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 细胞株 构建流程 (1)构建目的基因过表达慢病毒重组质粒,并包装慢病毒; ...
4.细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。 5.分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达。若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达。