我们之前的工作发现,当PMA诱导的THP-1细胞通过CD47-SIRPα或IgG-FcγR的信号通路清除老化红细胞时,NLRP3炎症小体被激活,促炎细胞因子如IL-1β的分泌上调;而下调巨噬细胞NLRP3炎性小体的表达,则抑制了巨噬细胞对红细胞的吞噬能力[12-13...
特别是NLRP3炎症小体基因的表达增高,并且NLRP3炎症小体相关蛋白的表达也增高,我们还用激光共聚焦显微镜检测了NLRP3炎症小体在HTNV感染THP-1细胞后的定位情况,分别从基因和蛋白水平证实了HTNV感染可以引起NLRP3炎症小体的激活.此外,我们使用NLRP3siRNA和caspase-1抑制剂,进一步验证了NLRP3炎症小体在HTNV感染中的作用...
中山大学研究团队在探讨调整ANXA1/NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善巨噬细胞焦亡相关研究中,使用RFect siRNA转染试剂将靶向NLRP3的siRNA转染到人单核细胞白血病细胞THP-1细胞中进行敲低实验。qRT-PCR结果显示,转染…
NLRP3炎症小体的组装能够导致效应蛋白caspase‑1活化,进而促进IL‑1β成熟和分泌并启动炎症过程。 为了验证HMGB1对NLRP3炎症小体表达的影响,我们分别在RSV感染的THP‑1单核细胞中加入外源性rHMGB1和HMGB1抑制剂甘草素,共培养后检测NLRP3炎症小体表达情况,结果显示,rHMGB1可显著增加NLRP3、ASC、caspase‑1的蛋白...
中山大学研究团队在探讨调整ANXA1/NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善巨噬细胞焦亡相关研究中,使用RFect siRNA转染试剂将靶向NLRP3的siRNA转染到人单核细胞白血病细胞THP-1细胞中进行敲低实验。qRT-PCR结果显示,转染后实验组中NLRP3的表达与对照组相比可被敲低75%左右。相...
中山大学研究团队在探讨调整ANXA1/NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路改善巨噬细胞焦亡相关研究中,使用RFect siRNA转染试剂将靶向NLRP3的siRNA转染到人单核细胞白血病细胞THP-1细胞中进行敲低实验。qRT-PCR结果显示,转染后实验组中NLRP3的表达与对照组相比可被敲低75%左右。
于是作者将NLRP3、ASC和caspase-1与pro-IL-1β的野生型或突变型共转染293T细胞,并用ATP刺激,通过免疫印迹(图2G)和ELISA(图2H)实验发现,K143R突变会阻止pro-IL-1β剪切成活性的IL-1β,从而判断K143是pro-IL-1β加工的关键位点。随后再次通过免疫印迹检测转染了编码野生型pro-IL-1b-myc及其不同突变...
师兄你好!我刚开始在做THP-1 NLRP3炎症小体模型,请问用PMA诱导成为巨噬细胞以后,是否LPS按照常规操作,1μg/ml 3h左右,或者100ng/ml过夜,然后加NLRP3刺激剂例如Nigericin或者ATP,即可分泌IL-1β了嘛?还是需要LPS处理2天,将THP-1极化成M1型,再用ATP等刺激?谢谢师兄!坐等! 2022-07-05· 北京 回复1 ...
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本研究采用PERK抑制剂和PERK小干扰RNA预处理并经BCG感染THP-1细胞后,对PERK/ATF4/CHOP通路相关分子的表达、NLRP3炎性小体活化相关指标进行检测,旨在揭示BCG感染THP-1细胞后PERK/ATF4/CHOP通路对NLRP3炎性小体活化的调控作用,为进一步阐明巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫调节机制提供理论依据。