首先,培养THP-1细胞,并使用诱导剂如Phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)进行极化。通常使用50 ng/mL或100 ng/mL的PMA处理24-48小时,以诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞。 处理后,移除PMA,并用新鲜培养基孵育24小时,让细胞恢复并达到M0状态。形态变化: 单核细胞THP-1在PMA诱导后,从悬浮式生长变为贴壁生长。细胞...
THP-1细胞向M0巨噬细胞的分化 1.PMA诱导:通常使用佛波酯(PMA)将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞样细胞。常用方法是将THP-1细胞与150 nM的PMA孵育24小时。之后,将细胞在RPMI培养基中继续培养24小时,以使其稳定并成熟为M0巨噬细胞。2.细胞培养条件:在含10%胎牛血清、10 mM Hepes、1 mM丙酮酸盐和50 µM β...
这两个标记物可以帮助我们确认细胞是否成功诱导成了M0巨噬细胞。 后续实验 🧪 诱导完M0之后,我会进行不同药物的干预实验。不过要注意,后续使用的培养基里不能含有PMA哦。至于M1和M2的实验,我暂时还没经验,但可以参考一些文献,比如《Optimization of differentiation and transcriptomic profile of THP-1 cells into ...
THP-1 1.THP-1细胞的诱导分化 (1)THP-1用185ng/ml佛波酯(PMA,用DMSO溶解)作用6小时,诱导细胞分化为巨噬细胞(M0)。 (2)在PMA继续存在的情况下,通过分别: •与IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1表型极化。 •与IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,...
下图演示了如何将单核细胞分化为 M0/M1/M2 巨噬细胞。 (A)图是细胞表型变化的相差显微镜图像。可见,用200ng/mL PMA刺激 72小时后,悬浮的 THP-1 单核细胞分化为 M0 巨噬细胞,粘附在细胞壁上,并有伸展的突起。接着,再用20ng/mL IFN-γ和 100ng/mL LPS(诱导向M1分化) 或20ng/mL IL-4(诱导向M2分化...
佛波酯诱导THP-1分化为M0型巨噬细胞的条件优化
THP-1是急性单核细胞白血病细胞系,被广泛应用于炎症和免疫的研究,正常培养时为悬浮细胞,可在佛波酯(PMA)诱导下贴壁,形成类似M0型巨噬细胞,并且可在外界的诱导下继续分化。近年来,研究发现Keloid存在CD301b+巨噬细胞的聚集,并支持Keloid...
目的优化诱导THP-1细胞分化为M0型巨噬细胞所需的佛波酯(PMA)浓度和刺激时间.为研究生物活性材料对巨噬细胞表型和功能的调控作用奠定实验基础.方法分析不同PMA浓度与刺激时间下THP-1细胞的形态,贴壁程度,M0型巨噬细胞表面标志物以及巨噬细胞M1和M2表型相关基因的表达.结果在25~100 ng/mL PMA浓度范围和24~72 h刺...
血细胞Thp1,Molm13,M0LT4,白血病是一种造血系统的恶性肿瘤,是国内十大高发恶性肿瘤之一,多发于儿童和青少年。其中急性白血病具有发病急、发展快、病死率高的特点。是各大院校和科研单位研究的重点,所以白血病细胞株基础实验中常用的细胞系。
【摘要】目的 用流式细胞术明确单独使用PMA诱导THP-1细胞分化而来的巨噬细胞的分化情况.方法首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞.显微镜下观察三种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子...