Tet-on系统是一种基因表达调控技术,其核心在于将带有tet-on元件的载体与目的基因连接,然后将其转入细胞。在细胞培养过程中,如果希望诱导目的基因表达,则需向培养基中添加四环素。四环素的存在会促使tet-on系统启动目的基因的表达,从而实现对基因表达的精确控制。这一过程能够人为调节基因表达的时间和强度...
利用tet-on表达调控载体,包装成工具病毒,最后在实验中即可进行相应的基因操作,可直接感染细胞进行基因的诱导表达;也可注射动物,随后通过DOX的小鼠饲养调控工具病毒是否发挥作用。 体外-诱导型慢病毒使用-细胞实验-tet-on慢病毒 在未加入Dox的时候,目的基因也会有非常微弱的表达,这种表达强度随着Dox的增加而增加。 体内...
JurkatTet-on细胞系的建立 细胞系的建立 张晶王泓威吴宁华沈琲"(中国医学科学院基础医学研究所,中国协和医科大学基础医学部,医学分子生物学国家重点实验室,北京"联系人)摘要系统是利用大肠杆菌转座子中四环素阻遏操纵子的调控元件在真核细胞中定量并特异地控制外源基因表达的体系将四环素控制的反式活化因子()基因...
U251MG 稳定表达 Tet-on 细胞系,Brain-Nervous System产品形式 细胞生物学保存建议 Vapor phase of liquid nitrogen, or below -130其他 Applied Biological Materials Inc(abm)公司是加拿大一家不断寻找用于生命科学研究和药物开发新产品的公司。众多的产品线全面涵盖了许多尖端技术,主要包括RT-PCR,RNA干扰的分子试剂...
该系统将便于基因功能和人类干细胞定向分化相关研究。“我们想探索的是如何更容易地控制转化的开启和关闭、外源基因的表达量,以及如何在完成转化后将DNA去除,”宾州州立大学生物工程学博士Lauren N. Randolph说。之前的方法能让DNA表达开启,但是无法完全做到删除所有插入DNA。中科博生。“我们采用了大量的多拷贝质粒,增加...
人T淋巴瘤细胞(TET-ON基因修饰)所有细胞均为原代细胞,非细胞系。细胞经过严格的控制(从组织来源、实验室条件等方面),纯度可达98%。不同的细胞传代次数不一。多数细胞种类是从胚胎提取,于原代(或二代)冻存在液氮中。细胞采用干冰运输,客户收到细胞后,从干冰中取出放入液氮中保存,待实验安排好后,解冻后即可以进行...
在Fadu细胞中,使用PiggyBac转座子与Tet-On系统共表达质粒,实现CNTNAP2的可诱导过表达。添加强力抗生素多西环素后,目标基因迅速在高水平上表达。验证结果:qPCR证实,在加入Dox后,Fadu细胞中CNTNAP2实现了可诱导过表达。Tet-On可诱导过表达系统为科研提供新工具,推动生物研究领域的创新。
1992年Goseen等人成功的利用原核基因调控元件构建了四环素(tetracycline,Tet)真核细胞基因调控表达系统。目前,此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。 1、四环素调控表达系统的基本原理 Tet调控表达系统通过诱导药物(如Tet)改变调控蛋白的构象,从而达到调控目标蛋白表达的目的。
的基础上的。rtTA与tTA有四个氨基酸的区别,在Dox 的存在下激活转录。在组织培养的研究中,无论使用哪个系统,诱导4小时后表达就能被检测到,12-24小时达到高峰。为了有效的使用Tet系统,我们必须选择高诱导表达目的基因,而且最低背景的双稳定细胞系。由于只须加入Dox就能引进基因表达,所以Tet-On系统是...