当无诱导药物存在时,TetR会与TetO结合,从而阻断下游耐药基因的表达;当有诱导药物存在时,TetR的构象会发生改变,并从TetO上脱离下来,使下游耐药基因得以表达,细菌从而获得耐药性。利用TetR和TetO特异性结合的特点,多种类型的Tet调控系统逐渐发展起来。其中,应用较广泛的为Tet-on激活型系统。Tet-on系统由调节表达...
tet-on系统在没有Tet相关诱导剂的时候,rtTA基本不与Ptet结合,下游基因表达受抑制;在给与诱导剂后,rtTA与Tet结合使其与Ptet结合,进而激活下游基因表达。但tet-on系统存在较高的表达泄露风险,后来开发了M2rtTA2代替rtTA,可以降低表达泄露的风险,之后再进一步对M2rtTA2设计5个氨基酸突变,表达的蛋白命名为Tet-on ...
Tet-on系统由调节表达载体和反应表达载体组成。调节表达载体包含一个人巨细胞病毒早期启动子(PhCMV)和反...
AAV诱导型基因表达载体结合了载体家应用广泛的AAV载体系统和Tet-On基因诱导表达系统,帮助您在体内体外都能进行四环素诱导表达实验。 Tet-On基因诱导表达载体系统是在哺乳动物细胞中进行实时GOI表达的强大工具。我们的Tet-On基因诱导表达载体系统在无四环素及其类似物(多西环素)的情况下可以做到GOI几近完全沉默并且在加入...
其中TRE是7个重复的TetO序列。 Tet-on原理: rtTA是由tTA突变4个氨基酸形成,它的表型与tTA相反。生理条件下,rtTA与TRE不结合,由于PminCMV缺少增强子,因此目的基因不表达;给于DOX后,DOX与rtTA的结合体与TRE结合,从而启动基因表达。
Tet-On诱导型基因表达系统是控制哺乳动物细胞中目的基因定时表达的强大工具。Tet-On诱导型基因表达载体作用:当不存在四环素及其类似物(如doxycycline)的情况下,目的基因几乎或完全沉默;当往体系中添加四环素或其他类似物(如doxycycline)时,目的基因得到快速高水平表达。四环素不存在的情况下时,衍生于TeR(Tet抑制蛋白)和KRA...
Tet-On诱导型基因表达系统是控制哺乳动物细胞中目的基因定时表达的强大工具。Tet-On诱导型基因表达载体作用:当不存在四环素及其类似物(如doxycycline)的情况下,目的基因几乎或完全沉默;当往体系中添加四环素或其他类似物(如doxycycline)时,目的基因得到快速高水平表达。四环素不存在的情况下时,衍生于TeR(Tet抑制蛋白)和KRA...
我们的Tet-On诱导基因表达载体旨在在没有四环素的情况下实现GOI的几乎完全沉默,并在添加四环素时实现强而快速的表达。慢病毒诱导基因表达载体来源于第三代慢病毒载体系统。它针对大肠杆菌中的高拷贝数复制、活病毒的高滴度包装、各种细胞的高效病毒转导、高效载体整合到宿主基因组中以及高水平转基因表达进行了优化。
pLKO-Tet-ON 诱导型慢病毒干扰载体shRNA质粒 第三代慢病毒shRNA表达载体,四环素诱导型,H1启动子 嘌呤霉素筛选,氨苄青霉素抗性 用途: 3rd generation lentiviral plasmid for inducible expression of shRNA; puromycin selection 质粒类型: 慢病毒载体 载体大小: ...
在设计tet-on表达载体时,需要考虑以下几个方面: 1. 启动子的选择,tet-on系统通常使用tetracycline响应元件控制基因的表达,因此需要选择适合的启动子来驱动tetracycline转录激活因子(tTA)基因的表达,常用的启动子包括CMV启动子、TRE启动子等。 2. tetracycline响应元件的构建,tetracycline响应元件通常包括tetracycline响应控制...