在基因功能研究领域,Tet-On系统通过精确控制基因表达,帮助科学家揭示了基因在生命活动中的关键作用。同时,在疾病模型的构建上,它也被用于创建可诱导表达疾病相关基因的细胞或动物模型,从而推动了疾病机制研究的深入进行。此外,Tet-On系统还为药物研发提供了一个高效的筛选环境,大大加速了新药的研发进程。让我们通过...
Tet-on系统:如果只需要在某一时间段表达目的基因,那么对于tet-off系统在该时间段以外就需要持续使用诱导剂处理,显然是不方便的。于是Gossen带领团队在1995年开发了tet-on系统来解决这一问题,该系统与tet-off相反,它需要添加诱导剂来激活基因表达。实现tet-on系统与tet-off系统的不同点在于对TetR做了突变,产生...
Tet-On系统是一种引人瞩目的基因表达调控技术,它允许科研人员根据需要精确操控目标基因的表达。这一系统的突破性在于它能够实现可诱导的、稳定的基因表达,为生物学研究提供了更加灵活和精准的工具。 二、如何实现可操控的基因表达? Tet-On系统的原理基于脱氧胸苷鸟嘌呤(Tet)转录激活蛋白的特殊性质。当研究者引入Tet-...
(一) Tet调控表达系统基本概念 ●Tet调控表达系统简介:通过诱导药物(如四环素和强力霉素等)改变调控蛋白的构象,从而达到调控目标蛋白表达的目的。 ● Tet调控基因表达系统原理:以大肠杆菌Tn10转座子上Tet抗性操纵子为基础而建立的。Tet阻遏蛋白(Tet repressor protein, TetR)与Tet操纵子(Tet operator, TetO)能够特异...
简介 四环素(Tet)诱导调控表达系统,是在大肠杆菌Tn10转座子中特异的Tet抗性操纵子基础上建立起来的一种用于诱导基因表达的调控系统。目前,此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。 简单地说,Tet诱…
Tet-On系统利用Tet转录激活蛋白的特性,通过加入特定的诱导剂,如Doxycycline,实现基因的可诱导表达。一旦加入诱导剂,系统如同开关被激活,启动目标基因表达。三、Tet-On系统优势 1. 可操控性:研究者可根据需求随时开启或关闭基因表达。2. 稳定性:一旦启动,基因表达保持稳定,确保实验数据可靠。3. 高度...
3. Tet-on调控系统的优势 高效率:无诱导时目的基因表达水平低,最高诱导倍数可达10000倍;原核来源的TetR和TetO特异性结合,哺乳动物内无类似靶序列。 精准调控:药物剂量及用药时间可控。安全:Tet及其衍生物应用多年,安全可靠;低剂量即可获得良好的效果。可逆性:去除诱导剂后可使系统关闭;可反复加入诱导,多次启动诱导。
猿猴病毒40T四环素诱导表达系统强力霉素四环素诱导表达系统(Tet-off/Tet-on系统)是比较成熟的真核生物基因诱导表达系统之一,具有高效,无毒,严密开/关功能的特点. 猿猴病毒40T(SV40T)是一种病毒癌蛋白, 其与肿瘤抑制蛋白p53和Rb结合, 并使之失活, 从而消除它们抑制细胞生长的功能, 使细胞分裂加速, 形成肿瘤. 利用...
Tet-On® 3G 诱导表达系统实验流程 一、测验 共转染pTRE3G-GOI 载体和pCMV-Tet3G (比例1:4) HeLa 或HEK 293,或靶细胞。Dox诱导目的表达之后,选择合适的特异基因分析方法进行分析目的基因的表达情况,例如:Western blot Northern blot qRT-PCR 基因特异性功能分析 或者,将pTRE3G-GOI载体转染Tet-On 3G ...
我们的Tet-On诱导基因表达载体旨在在没有四环素的情况下实现GOI的几乎完全沉默,并在添加四环素时实现强而快速的表达。慢病毒诱导基因表达载体来源于第三代慢病毒载体系统。它针对大肠杆菌中的高拷贝数复制、活病毒的高滴度包装、各种细胞的高效病毒转导、高效载体整合到宿主基因组中以及高水平转基因表达进行了优化。