Tet-on 型四环素诱导系统的工作原理是什么?Tet调控表达系统通过诱导药物(如四环素和强力霉素等)改变调控蛋白的构象,从而达到调控目标蛋白表达的目的。Tet调控基因表达系统是以大肠杆菌Tn10转座子上Tet抗性操纵子为基础而建立的。Tet阻遏蛋白(Tet repressor protein, TetR)与Tet操纵子(Tet operator, TetO)能够特异...
让我们通过一个具体的案例来进一步了解Tet-On系统的应用。在一个研究项目中,科研人员利用Tet-On系统在Fadu细胞中实现了CNTNAP2基因的可诱导过表达。他们通过PiggyBac转座子将目标基因与Tet-On系统整合到宿主细胞的染色体中。当向系统中添加强力抗生素多西环素(doxycycline)时,CNTNAP2基因便会在高水平上迅速表达。...
Tet-on系统:如果只需要在某一时间段表达目的基因,那么对于tet-off系统在该时间段以外就需要持续使用诱导剂处理,显然是不方便的。于是Gossen带领团队在1995年开发了tet-on系统来解决这一问题,该系统与tet-off相反,它需要添加诱导剂来激活基因表达。实现tet-on系统与tet-off系统的不同点在于对TetR做了突变,产生...
Tet-On系统的原理基于脱氧胸苷鸟嘌呤(Tet)转录激活蛋白的特殊性质。当研究者引入Tet-On基因并加入特定诱导剂(如Doxycycline),这个系统就会像按下开关一样启动,使得目标基因的表达水平如期而至。 三、为什么选择Tet-On系统?可诱导性:可根据研究需求随时开启或关闭基因表达。稳定性:一旦启动,基因表达将保持稳定,为实验...
Tet-On诱导表达辅助载体,定制服务 Tet - On 系统基于四环素(Tet)响应元件和转录激活因子的相互作用原理。Tet - On 诱导表达辅助载体主要包含几个关键部分。首先是一个启动子,这个启动子可以驱动后续基因的表达,但它的活性受到四环素响应元件的调控。在没有四环素或其衍生物(如强力霉素)存在时,启动子处于相对低活性...
简介 四环素(Tet)诱导调控表达系统,是在大肠杆菌Tn10转座子中特异的Tet抗性操纵子基础上建立起来的一种用于诱导基因表达的调控系统。目前,此系统已被广泛应用于基因功能和基因治疗领域的研究。 简单地说,Tet诱…
载体容量小:AAV是我们所有病毒载体系统中装载量最小的。AAV的两个ITR之间所能容纳的最大序列长度是4.7kb。在Tet-On系统中,用于病毒包装、转导和四环素诱导的基因序列另外占用2.1kb,因此留作自定义的GOI长度需要小于2.6kb。 难以转导特定类型的细胞:当利用合适的血清型进行包装时,我们的AAV载体系统可以转导很多不同类...
Tet-On诱导型基因表达系统是控制哺乳动物细胞中目的基因定时表达的强大工具。Tet-On诱导型基因表达载体作用:当不存在四环素及其类似物(如doxycycline)的情况下,目的基因几乎或完全沉默;当往体系中添加四环素或其他类似物(如doxycycline)时,目的基因得到快速高水平表达。四环素不存在的情况下时,衍生于TeR(Tet抑制蛋白)和KRA...
Tet-On诱导型基因表达系统是控制哺乳动物细胞中目的基因定时表达的强大工具。Tet-On诱导型基因表达载体作用:当不存在四环素及其类似物(如doxycycline)的情况下,目的基因几乎或完全沉默;当往体系中添加四环素或其他类似物(如doxycycline)时,目的基因得到快速高水平表达。 这是通过多组分系统实现的,即四环素不存在的情况下,...
我们的Tet-On诱导基因表达载体旨在在没有四环素的情况下实现GOI的几乎完全沉默,并在添加四环素时实现强而快速的表达。慢病毒诱导基因表达载体来源于第三代慢病毒载体系统。它针对大肠杆菌中的高拷贝数复制、活病毒的高滴度包装、各种细胞的高效病毒转导、高效载体整合到宿主基因组中以及高水平转基因表达进行了优化。