【解析】TAIL-PCR的基本原理:以基因组DNA为模板,利用依照目标序列旁的已知序列设计3个较高退火温度的嵌套特异性引物(specal prime,SP)和1个具有低T,值的短的随机简并引物(Aritary degenerateprime,AD)相组合,通过3轮具热不对称的温度循环的分级反应来进行PCR扩增,获得已知序列的侧翼序列。TAIL-PCR一般分为3次反应...
热不对称交错PCR(thermalasymmetricinterlacedPCR,TAIL-PCR)是一种用来分离与已知序列邻近的未DNA序列的分子生物学技术。在分子生物学研究领域中,利用该技术分离出的DNA序列可以用于图位克隆、遗传图谱绘制的探针,也可以直接测序。该技术技术简单易行,反应高效灵敏,产物的特异性高,重复性好,能够在较短的时间内获得目标...
•一.TAILPCR技术原理•二.TAILPCR实验操作流程•三.TAILPCR注意事项•四.TAILPCR应用 •一.原理：热不对称性PCR(thermal asymmetricinterlacedPCR,简称TAILPCR)，是利用目标序列旁的已知序列设计3个嵌套的特异性引物(specialprime,简称sp1,sp2,sp3),用它们分别和1个具有低Tm值的短的随机简并引物(Arbitrary...
在利用特异引物和随机引物进行PCR中一般有3种产物生成:①由特异性引物和简并引物扩增出的产物;②由同一特异性引物扩增出的产物;③由同一简并引物扩增出的产物。 在TAIL-PCR反应中,其中后2种目标产物可以通过以嵌套的特异性引物进行的后续反应来消除。 TAIL-PCR技术简单易行,反应高效灵敏,产物的特异性高,重复性好...
TAIL-PCR的原理及步骤 热不对称交错PCR( Thermal Asymmetric Interlaced PCR ,简称TAIL-PCR) 是一种用来分离与已知序列邻近的未知DNA 序列的分子生物学技术. 利用该技术分离出的DNA 序列可以用于图位克隆、遗传图谱绘制的探针,也可以接测序。1.反应原理 TAIL-PCR 技术的基本原理是利用目标序列旁的已知序列设计 3...
TAIL-PCR，即交错式热不对称PCR，也称为巢式PCR，是一种用于进行染色体步移的创新技术，被称为Genome Walking技术。这项技术的独特之处在于，它使用三个嵌套的特异性引物和简并引物进行连续的PCR循环。通过这种方式，可以利用不同的退火温度进行选择性扩增目标片段。所得到的片段可以直接用于探针标记和...
热不对称性PCR (thermal asymmetric interlacedPCR, TAIL-PCR)就是立在PCR技术基础上的染色体步移技术,为扩增已知序列旁侧的未知DNA片段提供了捷径3。此技术是Liu和Whitter在1995年首先研究报道的。该技术有简便、特异、高效、快速和灵敏的特点,和分离出的DNA序列可用于图位克隆、遗传图谱绘制及直接测序等优点,正是...
Tail PCR，即热不对称交错PCR，是一种特殊的PCR技术，由Liu等人在1999年提出。它是在常规的热不对称PCR基础上发展起来的，其核心原理是通过使用一系列特定的巢式引物和一个相对较短的非特异性引物（通常称为arbitrary primer）来扩增已知序列的两侧（尾部）序列。在Tail PCR中，关键在于两类引物的设计和...
该研究开发了一种基于非特异性扩增进行全基因组基因型检测(WGG)的高通量测序技术TAIL-PCR-seq (TAIL-peq),该技术具备重复性好、准确度高、成本低以及适用性广等特点,预期将在作物基因组育种中发挥重要作用。