【解析】TAIL-PCR的基本原理:以基因组DNA为模板,利用依照目标序列旁的已知序列设计3个较高退火温度的嵌套特异性引物(specal prime,SP)和1个具有低T,值的短的随机简并引物(Aritary degenerateprime,AD)相组合,通过3轮具热不对称的温度循环的分级反应来进行PCR扩增,获得已知序列的侧翼序列。TAIL-PCR一般分为3次反应...
原理 TAILPCR以基因组DNA作为模板,利用依照目标序列旁的已知序 列设计的3个较高退火温度的嵌套特异性引物(specialprimer,SP),和一个较短且Tm值较低的随机简并(arbitrarydegenerate,AD)引物组合,通过3轮具热不对称的温度循环的分级反应来进行PCR扩增,获得已知序列的侧翼序列。目的片段 TAIL-PCR一般分为3次反应 ...
TAIL-PCR 原理 TAIL-PCR 定义:热不对称交错PCR(ThermalAsymmetricInterlacedPCR,简称TAIL-PCR)是一种用来分离与已知序列邻近的未知DNA序列的分子生物学技术。基本原理:利用目标序列旁的已知序列设计3个嵌套的特异性引物(specialprimer,简称sp1,sp2,sp3),用它们分别和1个具有低Tm值的短的随机简并引物(Arbitrary...
1.反应原理 TAIL-PCR 技术的基本原理是利用目标序列旁的已知序列设计 3 个嵌套的特异性引物(special prime ,简称sp1 ,sp2 ,sp3 ,约20 bp) ,用它们分别和1个具有低Tm 值的短的(14 bp) 随机简并引物(Arbi-trary degenerate prime 简称AD) 相组合,以基因组DNA 作为模板,根据引物的长短和特异性的差异设计...
•一.原理:热不对称性PCR(thermal asymmetricinterlacedPCR,简称TAILPCR),是利用目标序列旁的已知序列设计3个嵌套的特异性引物(specialprime,简称sp1,sp2,sp3),用它们分别和1个具有低Tm值的短的随机简并引物(Arbitrarydegenerateprime简称AD)相组合,以基因组DNA作为模板,通过3轮具热不对称的温度循环的分级反应来...
原理 TAILPCR以基因组DNA作为模板,利用依照目标序列旁的已知序 列设计的3个较高退火温度的嵌套特异性引物(specialprimer,SP),和一个较短且Tm值较低的随机简并(arbitrarydegenerate,AD)引物组合,通过3轮具热不对称的温度循环的分级反应来进行PCR扩增,获得已知序列的侧翼序列。目的片段 TAIL-PCR一般分为3次反应 ...
在基因研究中,Tail PCR(末端 PCR)是一种用于获取 DNA 序列末端区域的常用方法。它的原理基于设计特定的引物,包括特异性引物和退火温度较低的兼并引物。首先,根据已知的 DNA 序列,设计三条同向的特异性引物。这些引物的退火温度较高,以确保它们的特异性。同时,设计一条或几条退火温度较低的兼并...
TAIL-PCR技术的原理是,它通过使用三个不同的引物来逐步扩展扩增区域,从而实现对染色体的精细定位。这些引物的长度和序列设计使其能够在目标区域进行特异性扩增,而避免了非特异性扩增的干扰。在TAIL-PCR过程中,首先使用第一个特异性引物进行PCR扩增,产生初始的扩增片段。随后,使用第二个特异性引物和第...