对于T-DNA插入型突变体的鉴定可以通过三引物法来实现。 2 三引物法鉴定突变体的原理 2.1 关于Ti质粒和T-DNA Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移,插入植物染色体DNA中,Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。人们根据这一现象,将Ti质粒...
(1)用某种限制酶处理水稻突变体A的DNA(如下图所示)后,用DNA连接酶将两端的黏性末端连接成环,以此为模板,利用图中的引物___(填序号)组合进行PCR扩增,目的是扩增出T-DNA插入位置两端的未知序列,反应过程中引物与模板DNA链碱基互补配对结合的阶段是___。 (2)将T-DNA两端的未知序列与野生型水稻基因组序列比对,...
科研人员利用这一原理来构建稳定遗传的大豆突变体库。 (1)科研人员分别将序列D和基因A作为___,插入含卡那霉素抗性基因的T-DNA上,利用农杆菌转化植物,筛选得到转D植株和转A植株。 (2)将得到的转D植株或转A植株自交,若某植株所结种子中具有卡那霉素抗性的占___,则判断该植株为T-DNA单拷贝插入。继续种植具有...