鉴定拟南芥T-DNA插入的突变体有专门的网站可以使用,它们分别是突变体突变信息查询网站,以及鉴定突变体的引物设计网站,具体的网站信息如下所示:突变信息查询网站:http://signal.salk.edu/cgi-bin/tdnaexpress/引物设计网站:http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 利用突变信息查询网站查询拟南芥T-DNA插入信...
PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP...
PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP...
突变体鉴定的步骤 1.T-DNA插入基因的基因组序列;2.T-DNA插入方向的确定;3.T-DNA插入位置的确定;4.引物设计;5.PCR扩增;6.电泳检测,T-DNA插入基因的基因组序列 点击基因编号进入网页 点击sequenceviewer进入 点击nucleotideview进入 点击突变体编号后进入的网页 进入网站查找基因突变体及插入方向 实验设计 T-DNA...
实验十、模式植物拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 下载积分: 200 内容提示: LOGO模式植物拟南芥T T- - DNA 插入突变体的鉴定西南大学 文档格式:PPT | 页数:22 | 浏览次数:17 | 上传日期:2024-03-07 08:38:52 | 文档星级: LOGO模式植物拟南芥T T- - DNA 插入突变体的鉴定西南大学 阅读...
T-DNA插入鉴定实验报告.docx,1 1 / 1 文档可自由编辑 T-DNA 插入突变体的鉴定 时明辉 同组者: 薛敏 学号:202300220239 摘要 Ti 质粒是上有一段特别的 DNA 区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA 区段能自发转移进植物细胞,并插入植物染色体DNA 中。所以 Ti 质粒上的这一段
在设计引物前,需查询TAIR以获取插入位点和方向信息。通过NCBI的工具输入基因所在染色体序列号,设置引物范围,并选择Refseq数据库和物种Arabidopsis thaliana,开始设计引物。完成引物设计后,可进行合成引物并进行后续实验。此方法提供了鉴定T-DNA插入突变体的有效手段。
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒,长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因,感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织,失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
3. 用PCR方法鉴定T-DNA插入纯合突变体 ▪ 农杆菌Ti质粒转化植物细胞后,在获得的后代分离群体中, 有T-DNA插入的纯合突变体,杂合突变体,和野生型。在 突变体研究中,需要的材料是纯合突变体,所以必须从分 离群体中将纯合突变体鉴定出来。 ▪ PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三 个引物LP、RP和...
农杆菌Ti质粒转化植物细胞后,在获得的后代分离群体中,有T-DNA插入的纯合突变体,杂合突变体,和野生型。在突变体研究中,需要的材料是纯合突变体,所以必须从分离群体中将纯合突变体鉴定出来。 本次实验中,采用液CTAB(或者TSP法)提取拟南芥植株的DNA,然后PCR将所获DNA扩增,在之后采用琼脂糖凝胶电泳技术,分离处长度不一...