PCR方法为鉴定纯合突变体提供了有利手段。它利用三个引物LP、RP和BP,其中LP和RP是植物基因组上T-DNA插入位点两测的引物,BP是T-DNA区段上的引物。 经过PCR,在野生型植株,LP和RP这对引物扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带);在杂合突变体,LP和RP能扩增出分子量较大的产物(野生型基因,大带),另外BP和RP...
(6)T-DNA存在于诱导形成的拟南芥突变体植株的DNA中.DNA连接酶可将不同的DNA片段进行连接.因为DNA两条链反向平行,由图示环状DNA外侧链DNA合成方向可判断,DNA扩增过程所选的引物应为B、C,这样可确保被插入的基因片段得到复制.要注意DNA两条单链反向平行,B、C作为引物可保证插入的基因片段优先复制.故答案为:(1)...
T-DNA可能随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植物形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-
三引物法鉴定T-DNA插入突变体的基因型,若LP+RP不能扩增出条带则改植株的基因型一定不是___; 若LBa1+RP能够扩增出条带,那么该T-DNA插入方向为___;若LBa1+LP能够扩增出条带,那么该T-DNA插入方向为___。 参考答案: 野生型;正向;反向点击查看答案 你可能感兴趣的试题 单项选择题下列...
三引物法鉴定T-DNA插入突变体的基因型,若FP+RP不能扩增出条带,则该植株的基因型一定不是___; 若LBa1+RP能够扩增出条带,那么该T-DNA插入方向为___;若LBa1+FP能够扩增出条带,那么该T-DNA插入方向为___。 参考答案: 野生型\n正向\n反向点击查看答案 你可能感兴趣的试题 单项选择题下列...
1 知乎:三引物法鉴定T-DNA插入突变体 https://zhuanlan.zhihu.com/p/377200556 2 LP RP 引物设计网站: T-DNA Primer Design http://signal.salk.edu/tdnaprimers.2.html 3 简书: 拟南芥突变体信息查询 https://www.jianshu.com/p/db695e0756ba...
T-DNA可随机插入植物基因组内,导致被插入基因发生突变.用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥,待植株形成花蕾时,将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化.在适宜条件下培养,收获种子(称为T1代). (1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾,需要去除 ...
本实验即检测所得植株是否为T-DNA的插入突变体。 1.引言 Ti质粒是土壤农杆菌的天然质粒,该质粒上有一段特殊的DNA区段,当农杆菌侵染植物细胞时,该DNA区段能自发转移进植物细胞,并插入植物染色体DNA中。Ti质粒上的这一段能转移的DNA被叫做T-DNA。若将Ti质粒进行改造,把感兴趣的基因放进T-DNA序列中,通过农杆菌...
拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定 09生工吴超 200900140129 一、实验原理 T-DNA插入法是反向遗传学研究的重要手段。T-DNA是农杆菌的一个大质粒，长度在25kb左右。野生型农杆菌的T-DNA上带有激素合成基因，感染植物后会导致植物细胞快速增殖形成愈伤组织，失去分化能力。所以一般实验使用改造后的农杆菌——T-DNA中导入了卡...
1、拟南芥TDNA插入突变体的鉴定实验目的1. 熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法;2. 掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突 变体的方法。DNA插入鉴定的原理LBa LBbpZone Exl5 Max N Ext3 pZone突变体鉴定的步骤1. T-DNA插入基因的基因组序列;2. T-DNA插入方向的确定;3. T-DNA插入位置的确定;4. 引物设计;...